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背景乳腺癌是一种常见的女性恶性肿瘤,并为女性癌症死亡的主要病因,最新统计结果显示乳腺癌占所有女性癌症病例数的23%和癌症死亡数的14%。然而,乳腺癌发生发展和转归的遗传学、表观遗传学机制远未完全揭示,造成防治上的困难。抑癌基因失活及功能紊乱是导致乳腺癌发生发展的主要病理因素之一。我们前期研究观察到候选抑癌基因C2orf40的表达与乳腺癌预后密切相关,且C2orf40的失活源于C2orf40启动子的超甲基化,但C2orf40在乳腺癌中的作用及其机制尚不清楚。因此,进一步探索研究抑癌基因C2orf40功能与乳腺癌发生发展和转归的关系,揭示乳腺癌发生发展的精确机制,对设计合理治疗药物、判断预后、进一步提高我国乳腺癌的治疗水平具有重要意义。目的1建立稳定表达C2orf40和C2orf40基因沉默的乳腺癌细胞系,为研究C2orf40的功能提供细胞研究模型。2观察C2orf40对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。3初步探讨C2orf40在乳腺癌中发挥生物学作用的机制。方法1细胞系的建立：应用逆转录病毒转导法将pBabe-puro-C2orf40、 pBabe-puro真核表达载体感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和BT549,pSuper-puro-sh. C2orf40. A和pSuper-puro-sh. C2orf40. B两种C2orf40基因沉默质粒以及空白质粒pBabe-puro感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-468,经嘌呤霉素筛选得到C2orf40稳定表达和C2orf40基因沉默的乳腺癌细胞系,反转录聚合酶链法(RT-PCR)法验证C2orf40在感染后的MDA-MB-231、BT549和MDA-MB-468乳腺癌细胞系中的表达。2C2orf40对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响：采用四氮唑蓝盐(MTT)法和克隆集落形成实验观察细胞体外增殖情况；采用划痕法、Matrigel基底膜侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力。3C2orf40影响细胞生物学行为的可能机制：通过流式细胞术检测细胞周期,用qPT-PCR和Western Blot实验检测UBE2C的表达情况,探讨C2orf40与UBE2C的关系。结果1稳定感染C2orf40基因的MDA-MB-231和BT549细胞中C2orf40基因稳定表达；C2orf40基因沉默的MDA-MB-468细胞中C2orf40基因表达降低,表明细胞系构建成功。2C2orf40高表达的乳腺癌细胞其生长速度减慢,克隆形成能力降低,细胞的迁移性和侵袭性被抑制；基因沉默C2orf40的乳腺癌细胞其生长速度加快,克隆形成能力、细胞的迁移和侵袭能力均增强。3C2orf40高表达能够将细胞阻滞在G2/M期,可能与其下调UBE2C的表达有关。结论1C2orf40能够明显抑制乳腺癌的细胞增殖,迁移和侵袭能力。2C2orf40高表达能够将细胞阻滞在G2/M期,C2orf40对乳腺癌细胞生物学功能的影响可能与UBE2C有关。