系统性白色念珠菌感染致死率极高,用药后的致死率仍为70%,因此研制有效的疫苗抵抗白色念珠菌感染至关重要。现如今,关于抗白色念珠菌疫苗的研究仍存在些许问题,如疫苗免疫原性较弱、安全性低等。本实验室已构建有以pcDNA3.1为载体的核酸疫苗pD-HSP90C,因载体pcDNA3.1含有氨苄霉素抗性基因等问题而不能应用于人体。为了解决这些难题,我们选用能够进行高复制高表达且可用于人体实验的真核表达载体pVAX1为载体质粒,重新构建核酸疫苗pV-HSP90C,并探究其免疫活性。在此基础上,本实验选用可增强机体免疫应答的CpG ODN为佐剂,探究其在核酸疫苗中的免疫增强作用。本实验将含有白色念珠菌热休克蛋白90(HSP90)C表位的片段作为目的基因,以pVAX1为载体,构建白色念珠菌核酸疫苗pV-HSP90C及含有CpG ODN的pV-HSP90C-CpG,并对其进行相应的免疫学初探。将C57BL/6J小鼠分组,分别注射以上重新构建的核酸疫苗。免疫方式为肌肉注射及电穿孔,免疫两次,间隔时间为两周,二次免疫两周后收集抗血清。通过Western Blot检测免疫小鼠抗血清中的特异性抗体;ELISA检测小鼠抗血清中的特异性抗体滴度;ELISA试剂盒检测小鼠抗血清中IL-4和IL-12的含量。Western Blot检测发现,pV-HSP90C组小鼠血清中有特异性抗体产生;ELISA检测小鼠抗血清中IgG、IgG1和IgG2b特异性抗体滴度,发现与PBS组相比,pV-HSP90C组小鼠抗血清中IgG、IgG1和IgG2b特异性抗体滴度有显著的提高;ELISA检测小鼠抗血清中IL-4和IL-12含量,发现pV-HSP90C组小鼠抗血清中IL-4和IL-12含量也明显高于PBS组。结果表明,pV-HSP90C能够显著提高Th1型及Th2型免疫应答,具有一定的免疫原性。在此基础上,pV-HSP90C-CpG免疫小鼠的实验结果显示,与pV-HSP90C组相比,血清中的抗体IgG和IgG2b滴度及IL-12的含量显著提高,而IgG1滴度及IL-4的含量并未提高。本研究说明CpG ODN作为佐剂有效增强了核酸疫苗的免疫效应,提高了Th1型免疫应答。本实验为白色念珠菌DNA疫苗的进一步开发利用及CpG ODN在佐剂领域中的应用奠定了基础。