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目的:明确齐墩果酸（OA）所致肝细胞损伤对胆汁酸外排转运体的调控作用。方法:（1）分别提取C57BL/6J雄性野生型（WT）小鼠、FXR敲除（FXR-KO）小鼠和BSEP敲除（BSEP-KO）小鼠原代肝细胞,采用“三明治”培养法培养至第3天[1],给予OA的剂量为0,20,40,60,80,100μM,给药时间为2 d,通过MTT、LDH法检测原代肝细胞活力的影响。（2）提取雄性C57BL/6J小鼠原代肝细胞,培养至第3天,给予OA剂量为0,20,40,60μM,给药2 d后收集细胞样本。实时荧光定量PCR法（RT-PCR）检测OA对小鼠原代肝细胞中胆汁酸核受体（FXR）和胆汁酸外排转运体（BSEP和MRP2）m RNA转录水平;蛋白免疫印迹法（WB）法检测肝细胞中BSEP蛋白表达水平。给药6 h后收集样本,采用UPLC-MS/MS检测肝细胞中BSEP的外排功能;荧光检测荧光标记的胆管强度。（3）提取雄性C57BL/6J小鼠原代肝细胞,培养至第3天,给予OA剂量为0,20,40,60μM,分别在OA给药前1 h给予GW4064（10μM）、BMS-986020（7.5μM）、Sulfanitran（15μM）、MK571（30μM）进行预处理,给药2 d后收集细胞样本,通过LDH法检测原代肝细胞活力的影响。（4）将C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组和OA组（443.88、641.16mg/kg）,FXR激动剂GW4064组（70 mg/kg）,GW4064（70 mg/kg）+OA组（641.16 mg/kg）,BSEP抑制剂BMS-986020组（10 mg/kg）,BMS-986020（10mg/kg）+OA组（641.16 mg/kg）,MRP2激动剂组Sulfanitran（60 mg/kg）,Sulfanitran（60 mg/kg）+OA组（443.88 mg/kg）,MRP2抑制剂MK571组（15mg/kg）,MK571（15 mg/kg）+OA组（443.88 mg/kg）。分别在OA给药前7 h和1 h给予GW4064、BMS-986020、Sulfanitran、MK571进行预处理,给药5 h后,再收集血清、肝组织。采用肝生化试剂盒检测肝生化指标。RT-PCR法检测OA对小鼠中FXR、BSEP和MRP2 m RNA转录水平;WB法检测肝细胞中FXR、BSEP和MRP2蛋白表达水平。结果:（1）确定OA的浓度。MTT和LDH结果表明细胞活力在OA药物浓度100μM细胞活力下降至60%左右;LDH活性成浓度梯度增加;倒置光学显微镜下观察细胞形态在OA处理后细胞轮廓消失,间隙增大。因此后续选择0,20,40,60μM作为实验给药浓度。（2）FXR-KO小鼠能够减轻OA诱导的细胞毒性。在40μM OA处理后FXR-KO小鼠细胞存活率高于WT小鼠,细胞毒性降低。（3）BSEP-KO小鼠能够减轻OA诱导的细胞毒性。在BSEP-KO小鼠中,细胞活力在OA药物浓度100μM细胞活力下降至70%左右;倒置光学显微镜下观察细胞形态在OA处理后细胞损伤后细胞轮廓消失,间隙增大;在60μM OA处理后BSEP-KO小鼠细胞存活率高于WT小鼠,细胞毒性降低。（4）确定OA给药时间。荧光检测法鉴定胆管第三天开始形成,因此选择第三天作为实验给药时间。OA处理后显著增加胆管的损伤。（5）OA处理后抑制BSEP的外排功能。与空白组相比,cells组CA-D4总的积累量显著减少;cells+bile duct组CA-D4总的积累量显著减少。胆汁酸排泄指数降低。（6）原代肝细胞经OA处理后,胆汁酸核受体FXR和胆汁酸外排转运体MRP2、BSEP和MDR2 m RNA的转录水平受到抑制。在60μM OA处理后FXR-KO小鼠中MRP2、BSEP m RNA转录水平高于WT小鼠。在60μM OA处理后BSEP-KO小鼠中FXR m RNA转录水平高于WT小鼠。因此MRP2、BSEP在OA诱导的肝损伤中发挥重要作用。（7）OA处理后,胆汁酸核受体FXR和胆汁酸外排转运体MRP2、BSEP和MDR2 m RNA转录水平和蛋白的表达受到抑制。（8）FXR激动剂GW4064可显著减轻OA诱导的肝毒性。GW4064处理后显著减少肝脏的生化指标AST,ALT,AKP,TBA,增加了下游转运蛋白FXR、BSEP m RNA的表达;LDH活性显著减少,肝毒性减轻。（9）BSEP抑制剂BMS-986020可显著增加OA诱导的肝毒性。BMS-986020处理后显著增加的肝脏的生化指标AST,ALT,AKP,TBA;LDH活性显著增加,肝毒性增加。（10）MRP2激动剂Sulfanitran可显著减轻OA诱导的肝毒性。Sulfanitran处理后显著减少肝脏的生化指标AST,ALT,AKP,TBA,LDH活性显著减少,肝毒性减轻。（11）MRP2抑制剂MK571可显著增加OA诱导的肝毒性。MK571处理后显著增加肝脏的生化指标AST,ALT,AKP,TBA,LDH活性显著增加,肝毒性增加。结论:OA诱导的肝细胞损伤与转运体调控有关;OA通过抑制胆汁酸核受体的表达,从而下调胆汁酸外排转运体BSEP和MRP2的表达,导致胆汁酸外排受阻,肝细胞内胆汁酸增加,造成肝细胞损伤;同时,OA导致肝损伤作用机制可能与胆管损伤、紧密连接表达下降具有密切的关系。