目的:在MRI-病理对照基础上,探讨横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM参数Standard ADC值、D值、D*值及f值与其病理学MVD、VEGF表达的相关性。材料与方法:一、实验材料(一)实验动物雌性Balb/c裸鼠,22只,4-6周龄。(二)实验细胞株人胚胎性横纹肌肉瘤细胞株RD。(三)实验试剂高糖DMEM培养基、青链霉素、CD34抗体、VEGF抗体。(四)实验器材细胞培养箱、3.0T MR扫描仪、显微镜。二、实验方法(一)建立横纹肌肉瘤小鼠模型横纹肌肉瘤细胞培养于DMEM完全培养基中,收集处于对数期的细胞接种于裸鼠右背部皮下。(二)横纹肌肉瘤小鼠模型MR成像及图像后处理横纹肌肉瘤小鼠模型进行T1WI、T2WI及IVIM检查。通过GE ADW 4.7工作站的Functool软件获得Standard ADC、D、D*、f伪彩图,在IVIM原始图上信号最高处选取ROI获得相应参数值,将三次测量的平均值作为最终结果。(三)横纹肌肉瘤小鼠模型MRI-病理对照方法麻醉小鼠后,对小鼠进行体表标记,再进行MRI检查,检查完成后完整取出肿瘤,于福尔马林液中固定8小时后取出进行病理取材。(四)横纹肌肉瘤小鼠模型HE切片及观察切片依次经过二甲苯脱蜡、梯度酒精复水、苏木素染色、盐酸酒精分化、伊红复染、梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封片获得HE切片。在HE切片上选取观察范围,依次在低倍镜、中倍镜以及高倍镜下进行观察。(五)横纹肌肉瘤小鼠模型免疫组化染色及观察将切片放于烤箱中烤片,拿出后依次经过二甲苯脱蜡、梯度酒精复水、抗原修复、滴加适量一抗发生免疫反应、苏木素染色、梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封片获得免疫组化切片。在200倍镜下观察切片获取MVD计数和VEGF表达结果。三、观察指标(一)横纹肌肉瘤小鼠模型建立情况(二)横纹肌肉瘤小鼠模型MRI表现(三)横纹肌肉瘤小鼠模型组织病理学表现四、统计学方法采用SPSS 24.0软件分析获得数据。P<0.05被认为具有统计学意义。如果计数资料为正态分布,就对Standard ADC值、D值、D*值、f值分别与MVD计数、VEGF表达的相关性分析进行Pearson检验;如果计数资料为非正态分布,就对相关性分析进行Spearman检验。结果:一、横纹肌肉瘤小鼠模型建立情况22例横纹肌肉瘤小鼠模型肿瘤形成的时间为7-15天。在肿瘤细胞接种后46-60天肿瘤体积达到最大,其最大径约12.0–20.0 mm,体积约807.36–2220.10 mm3。二、横纹肌肉瘤小鼠模型MRI表现(一)常规MRI表现肿瘤位于裸鼠右背部皮下,T1WI呈均匀等信号或略高信号,T2WI呈均匀高信号,部分其内可见小斑片样更高信号。(二)IVIM表现22例横纹肌肉瘤小鼠模型肿瘤IVIM均呈高信号,其平均Standard ADC值、D值、D*值及f值分别为:1.068±0.232×10-3mm2/s、0.705±0.075×10-3mm2/s、5.920±1.815×10-3mm2/s及0.172±0.070。三、横纹肌肉瘤小鼠模型病理学表现(一)常规病理学表现病理大体检查发现肿瘤呈类圆形或不规则形,切面均呈灰白,质地较韧。显微镜下发现肿瘤细胞分布疏密不均,可见不规则坏死区,细胞呈小圆或卵圆形,核大深染,胞质少。(二)MVD计数及VEGF表达22例横纹肌肉瘤CD34免疫组化染色显示血管内皮细胞呈棕黄色,VEGF表达为细胞质或细胞间质呈棕黄色,其MVD计数平均值为21.91±9.47,VEGF表达平均值为20.33±7.89%,且MVD与VEGF表达呈中等正相关。四、横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM参数与其MVD、VEGF表达相关性(一)IVIM参数与MVD相关性横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM-D*值与MVD呈中等正相关,且具有统计学意义(P<0.05);Standard ADC值、D值及f值与MVD无相关性。(二)IVIM参数与VEGF表达相关性横纹肌肉瘤小鼠模型IVIM-D*值与其VEGF呈中等正相关,且具有统计学意义(P<0.05);Standard ADC值、D值及f值与其VEGF无相关性。结论:在MRI-病理对照基础上,对22例横纹肌肉瘤小鼠模型的IVIM参数与其病理学MVD、VEGF进行相关性分析,可得出下列结论:一、横纹肌肉瘤小鼠模型的IVIM参数D*值与其MVD有相关性,且呈正相关,即随着D*值增高,其病理学MVD增加,反之则减少;而横纹肌肉瘤小鼠模型的Standard ADC值、D值及f值与其MVD无相关性。二、横纹肌肉瘤小鼠模型的IVIM参数D*值与其VEGF有相关性,且呈正相关,即随着D*值增高,其VEGF表达增加,反之则减少;而横纹肌肉瘤小鼠模型的Standard ADC值、D值及f值与其VEGF无相关性。