【摘 要】
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背景:主动脉夹层是指内膜局部形成破口,血液进入主动脉中层,使内膜剥离形成真假腔的危重主动脉疾病,其发病迅速,死亡率高,早期诊断率较低,缺乏有效的药物根治,未治疗的患者中发病后每小时的死亡率增加1-2%。目前手术是治疗的有效手段。近年来我国主动脉夹层临床表现多样化,发病年龄年轻化,误、漏诊报道多,死亡率仍较高。主动脉夹层发病因素众多,发病机制尚不明确,对主动脉夹层的发病机制深入研究,能够为寻找该病的
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背景:主动脉夹层是指内膜局部形成破口,血液进入主动脉中层,使内膜剥离形成真假腔的危重主动脉疾病,其发病迅速,死亡率高,早期诊断率较低,缺乏有效的药物根治,未治疗的患者中发病后每小时的死亡率增加1-2%。目前手术是治疗的有效手段。近年来我国主动脉夹层临床表现多样化,发病年龄年轻化,误、漏诊报道多,死亡率仍较高。主动脉夹层发病因素众多,发病机制尚不明确,对主动脉夹层的发病机制深入研究,能够为寻找该病的治疗新途径提供理论基础。越来越多的研究表明主动脉夹层患者的基因水平表达异常是发病的遗传学基础。本研究主要从miR-145在主动脉夹层组织中的表达及miR-145在机械牵张诱导主动脉夹层血管平滑肌细胞的生物学功能来说明。目的:检测正常人与主动脉夹层病人的组织中miR-145的表达含量差异,验证miR-145参与主动脉夹层的发生与发展;探讨在正常人与主动脉夹层病人组织中SMAD3的表达含量并研究SMAD3对血管平滑肌细胞生物学功能的影响;通过干预miR-145的表达来探讨miR-145在机械牵张诱导下对血管平滑肌细胞的增殖和凋亡的影响。方法:取5例主动脉夹层病人和5例心脏移植供体病人的大动脉,分离出血管壁中层,应用RT-q PCR方法检测,分析正常人与主动脉夹层病人的组织中miR-145的表达含量差异;收集主动脉夹层病人的主动脉血管壁中层,提取并培养血管平滑肌细胞,miR-145 mimic转染培养的血管平滑肌细胞,RT-q PCR检测血管平滑肌细胞的转染情况;通过采用免疫组化和Western Blot检测在正常人和主动脉夹层病人血管中层组织SMAD3的表达情况;将培养的血管平滑肌细胞分为四组:静态培养组（静止组）,静止+牵张组,miR-145 mimic组,miR-145 mimic+牵张组,Western Blot检测血管平滑肌细胞的增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen PCNA）、程序性细胞死亡4（programmed cell death protein PDCD4）和SMAD3。结果:miR-145在正常人与主动脉夹层病人的组织均有表达,主动脉夹层血管组织中较正常组织表达明显下降;RT-q PCR分析表示miR-145明显上调在转染的血管平滑肌细胞（P<0.05）;主动脉夹层血管组织中SMAD3表达较正常血管组织升高;血管平滑肌细胞在机械牵张诱导下PCNA、PDCD4和SMAD3较静止组表达明显升高（P<0.05）;单纯过表达miR-145后,血管平滑肌细胞中的PCNA较对照组表达降低（P<0.05）,而PDCD4和SMAD3表达无明显差异（P>0.05）;对过表达miR-145的血管平滑肌细胞施加一定大小力度的机械牵张干预后,PCNA、PDCD4和SMAD3与血管平滑肌细胞静态培养下的表达情况无明显差异（P>0.05）;过表达miR-145的血管平滑肌细胞在机械牵张诱导下PCNA、PDCD和SMAD3较对照组的表达明显减少（P<0.05）。结论:hsa-miR-145可能通过调节SMAD3的表达来影响血管平滑肌细胞增殖与凋亡,而机械牵张通过下调hsa-miR-145从而促进了主动脉夹层的发生发展;机械牵张诱导血管平滑肌细胞增殖、促进细胞凋亡,miR-145在机械牵张诱导下维持血管平滑肌细胞的稳态。
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