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研究目的:制备EGFR单域抗体-iRGD融合蛋白修饰的负载紫杉醇双重靶向丝素蛋白纳米粒子(A-PTX-SF-NPs),对其体内外的肿瘤靶向性及抗肿瘤作用进行研究。研究方法:利用EDC/NHS反应体系作用将EGFR单域抗体-iRGD融合蛋白(anti-EGFR-iRGD)修饰在负载紫杉醇的丝素蛋白纳米粒子表面,通过动态光散射、透射电镜、傅里叶变换红外光谱等技术对修饰后的纳米粒子(A-PTX-SF-NPs)基本特征进行表征,使用荧光光谱仪测量并计算连接率。通过免疫印迹试验选取EGFR高表达的细胞株,考察其对EGFR高表达细胞在体内外的靶向性及抗肿瘤作用。研究结果:采用简单易行的方法实现了丝素蛋白纳米粒子与anti-EGFR-iRGD的连接。粒子经修饰后直径较前增加,约为186nm左右。同时,修饰后的粒子所含羧基较前增加。anti-EGFR-iRGD的连接率约为:76.27(%± 12.29%。对于EGFR高表达的Hela细胞株,anti-EGFR-iRGD修饰后的负载香豆素-6的丝素蛋白纳米粒子摄取量明显增加;在体外细胞毒试验中,A-PTX-SF-NPs对EGFR高表达的细胞表现出比PTX-SF-NPs更强的杀伤作用。在Hela裸鼠皮下移植瘤模型的抗肿瘤实验中,A-PTX-SF-NPs相对于PTX-SF-NPs有着更好的抗肿瘤作用。同时,通过近红外活体成像实验证实,修饰后的纳米粒子更容易被肿瘤摄取,体内靶向性更优。结论:融合蛋白修饰后的丝素蛋白载药纳米粒子的体内外靶向性与抗肿瘤作用更强,优于单独的载药粒子,具有潜在的临床价值。