人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一种呈小分子双链结构的DNA病毒,容易吸附在人的皮肤及粘膜深处诱发疾病。目前,临床中已发现200余种HPV临床亚型,可引起寻常疣、扁平疣、趾疣以及尖锐湿疣等多种皮肤疾病,其中以尖锐湿疣的危害最大,本课题主要研究尖锐湿疣的治疗效果[1]。尖锐湿疣(Condyloma acuminatum,CA)是一种由HPV感染好发于生殖器部位的皮肤增生性疾病,也是性传播疾病的一种,其发病率在我国的性传播疾病中位居前列,在性接触较高的欧美国家的发病率则更高,因而越来越多的学者投入到CA的研究中,CA受到了全球学者的广泛关注[2-3]。关于CA的发病机制目前仍没有一个很好的结论,也有研究表明CA发生可能与细胞周期紊乱有关[4]。HPV感染皮肤黏膜所致良性增生性感染疾病,临床治疗较为困难,亚临床感染和潜伏感染是CA复发率也较高的原因所在,部分还可能发生癌变,导致宫颈癌[5]。目前,临床上常采用免疫调节治疗,然而,不同患者对免疫治疗的反应也存在个体差异。尖锐湿疣正以巨大的杀伤力威胁着人们的健康。HPV感染细胞是阴寒离阳之物,扶正治疗主要以温阳气为主,温阳药物的特点不在激烈清楚细胞,而在缓和地诱变细胞。为此,采用人结肠癌腺细胞系Caco-2细胞(the human colon adenocarcinoma cell lines)单层细胞培养法模拟中药血清药理学方法给药,利用云南特色有效的回阳固元方中温阳药物对HPV感染细胞的诱导驯化作用,以此改变其细胞的阴阳状态,促使其阴态与阳态平衡。而回阳固元方则由回阳饮演化而来,回阳饮为清代四川名医郑钦安治疗下元亏损而设,以此为基础,云南省已故著名温阳大家“吴附子”吴佩衡先生创制大回阳饮[6],在临床上对多种中西医难治的疾病疗效颇佳,该方含附子、干姜,附子为第一温阳药,国内知名的温阳大家“吴附子”吴荣祖先生继续发展为回阳固元方,对包括尖锐湿疣在内的难治性疾病的疗效有了进一步提高。本研究中我们利用不同浓度的回阳固元方,经过Transwell转换池吸收以后,与尖锐湿疣患者皮损中提取的角质形成细胞-单细胞悬液和正常角质形成细胞悬液作用后,用流式细胞仪测定其细胞周期及细胞凋亡程度,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别检测其细胞中β-catenin mRNA(β-连环素)的表达情况,由于β-连环素的高表达较其他蛋白易于检测且表达量较多,所以检测其表达量以观察回阳固元方对HPV感染细胞生物学特性的影响。结果表明经RT-PCR方法检测的尖锐湿疣患者皮损角质形成细胞中β3-catenin mRNA的表达较对照组要高,这说明在尖锐湿疣的发病过程中某些蛋白可能出现过表达的情况。流式细胞仪和细胞分子生物学检测温阳药物激发后的HPV感染细胞的周期、细胞凋亡、细胞增殖能力都有不同程度的变化,细胞的生物学特性也发生了一定的改变,经中药作用后的细胞密集程度变小,细胞由朝圆形变化的趋势,其中细胞周期明显加快,增殖能力减弱,细胞的凋亡程度也发生了一定的改变。从而,我们在细胞学的角度寻找到中药制剂诱导HPV感染细胞的凋亡及对其细胞周期的影响。综上所述,我们利用回阳固元方的扶正作用在一定程度上诱导驯化了尖锐湿疣皮损的角质形成细胞,回阳固元方显示出了治疗尖锐湿疣的新药的潜在价值,其具有较高的学术研究价值,同时,也可为云南本地中药的开发应用提供有价值的研究成果。