目的:在慢性肝病的进展过程中,存在着NK细胞的耗竭现象,但是具体机制尚不清楚,本研究旨在探究(1)慢性乙型肝炎(Chronichepatitis B,CHB)患者CD4+调节性T细胞与NK细胞耗竭的关系;(2)肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)患者CD8+调节性T细胞和CD4+调节性T细胞及其与NK细胞的关系。方法:(1)从临床标本中收集CHB患者及健康对照者的外周血,对其生化指标及ALT,AST,HBVDNA,HBsAg,HBeAg 进行检测分析;(2)对 CHB 患者、HCC 患者或健康人外周血单个核细胞(PBMC)进行NK细胞和Treg细胞的表型检测;(3)分离出PBMC,在体外检测使用流式细胞术检测CHB患者NK细胞的功能变化;(4)将分离的PBMC在体外使用CHB患者或健康人血清进行培养后,流式细胞术检测细胞表型及功能的变化;(5)使用磁珠分离纯化NK细胞和Treg细胞,在体外进行共培养,研究Treg细胞和NK细胞相互作用的可能机制;(6)使用CBA细胞因子分析试剂盒,检测血清中或培养液上清中的细胞因子含量。结果:在CHB患者的研究中发现(1)患者外周血NK细胞抑制性分子NKG2A表达比例增高,且与HBV-DNA载量呈正相关;(2)NK细胞功能明显降低,阻断NKG2A可明显恢复NK细胞的功能;(3)CHB患者CD4+Treg细胞表达比例及其分泌IL-10明显增高,且CHB患者外周血NKG2A+NK细胞与IL-10+Treg细胞呈明显正相关;(4)在体外实验中发现CHB患者血清及HBeAg可通过IL-10诱导NKG2A+NK细胞表达,阻断IL-10可恢复NK细胞功能耗竭。在HCC患者的研究中发现(1)HCC患者CD8+调节性T细胞及CD4+调节性T细胞的比例高于健康人,且CTLA-4在癌组织表达显著高于癌旁组织;(2)HCC患者外周血及癌组织中NK细胞比例明显低于健康人和癌旁组织;(3)CD8+调节性T细胞和CD4+调节性T细胞均与NK细胞表达比例呈负相关。结论:CHB患者中存在NK细胞的耗竭和CD4+Treg细胞的增加,体外实验中发现HBeAg可通过诱导CD4+Treg细胞分泌IL-10介导NK细胞NKG2A的表达增高和功能降低。HCC患者中患者调节性T细胞比例与NK细胞呈负相关,提示在HBV相关HCC中,Treg细胞也可能参与负向调节NK细胞。