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目的：
临床研究部分：
①探讨虚实不同证候与不同病理分期结直肠癌的关联性；
②肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、癌抗原19-9(CA19-9)与炎性指标NLR在结直肠癌诊断及预后中的临床价值。
基础研究部分：
①通过分析距离结直肠癌癌灶旁不同部位组织中细胞外基质相关分子Ⅰ型胶原(COL1)、Ⅳ型胶原(COL4)及基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达差异，探讨肿瘤微环境理论下结直肠癌启动、侵袭、转移的分子机制，为结直肠癌的临床诊治提供一定的线索及寻找潜在的抗癌靶点；
②探讨结直肠癌中医辨证分型的分子基础，以期为制定结直肠癌个体化中西医结合治疗方案提供临床依据。
方法：
收集2019年4月-2019年10月于广州中医药大学第一附属医院肛肠科住院行手术治疗的45例结直肠癌患者的癌旁组织和远端正常组织及患者临床资料。
临床研究部分：分析患者术前肿瘤标志物CEA、CA19-9及炎性指标NLR与不同中医证型、不同临床病理特征的关系。
基础研究部分：癌旁组织取自距离癌灶1cm，远端正常组织取自距离癌灶8-10cm，取材深度达黏膜层及黏膜下层。HE染色法观察不同部位、不同病理分期肠组织的隐窝结构；免疫组化法检测不同部位、不同病理分期肠组织中细胞外基质分子COL1、COL4及MMP7的表达部位及表达量，进行差异分析及机制探讨。
结果：
1.随着肿瘤浸润深度增加、TNM分期增加，CEA随之增高(p＜0.05)；有淋巴结转移或远处脏器转移者，CEA值亦增高(p＜0.05)。
2.CEA与NLR联合检测具有较好的预测结直肠癌远处脏器转移的作用(P＜0.001)。
3.中医辨证为虚证的患者具有更高的CEA值(p＜0.05)。
4.HE染色：
①距离结直肠癌癌灶较远的远端正常组织中，隐窝结构相对正常，腺体紧密，排列整齐，腺腔单层排列，部分样本杯状细胞数量增多，分层排列；距离结直肠癌癌灶较近的癌旁组织中，异常隐窝病灶比例明显升高，柱状细胞及杯状细胞数量明显减少，排列紊乱，隐窝萎缩，有的隐窝结构完全消失，炎性细胞浸润增多，部分样本可见隐窝扭曲。
②非转移组的组织中，腺体排列整齐，致密，形态大致规则，部分样本腺体出现多量炎性细胞浸润；转移组的组织中，异常隐窝病灶比例明显升高，腺体形态不规则，细胞组分发生明显改变，核质比例增加，细胞核排列拥挤，腺腔柱状细胞及杯状细胞均减少，排列紊乱，隐窝明显萎缩，部分隐窝结构完全消失，丧失正常的组织结构。
5.免疫组化：
①COL1主要分布在黏膜层的隐窝之间以及黏膜下层的结缔组织之间。同非转移组(Ⅰ/Ⅱ期)相比，转移组(Ⅲ/Ⅳ期)肠组织中的COL1表达升高(P＜0.05)；癌旁组织中的表达量亦高于远端正常组织(P＜0.05)；
②COL4主要分布在黏膜层的腺管上皮的基底膜之间。同非转移组(Ⅰ/Ⅱ期)相比，转移组(Ⅲ/Ⅳ期)肠组织中的COL4表达降低(P＜0.05)；癌旁组织中的表达量亦低于远端正常组织(P＜0.05)；
③MMP7主要分布在肠上皮的胞膜及胞质。同非转移组(Ⅰ/Ⅱ期)相比，转移组(Ⅲ/Ⅳ期)肠组织中的MMP7表达升高(P＜0.05)；癌旁组织中的表达量亦高于远端正常组织(P＜0.05)；
④辨证属虚证组的患者中，与非转移者(Ⅰ/Ⅱ期)相比，出现转移者(Ⅲ/Ⅳ期)，COL4表达降低，COL1及MMP7表达升高(P＜0.05)；辨证属实证组的患者中，与非转移者(Ⅰ/Ⅱ期)相比，出现转移者(Ⅲ/Ⅳ期)，COL4表达降低，MMP7表达升高(P＜0.05)；而辨证属实证者，COL1表达与转移情况的差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.联合检测肿瘤标志物及炎性指标可提高结直肠癌诊断率，预测结直肠癌患者是否伴有远处脏器转移并指导术后复查频率。
2.正气不足与结直肠癌患者血清CEA值高表达相关。
3.靠近肿瘤部位以及伴有淋巴结或远处脏器转移患者的肠黏膜组织，其隐窝结构损害大，异常隐窝灶发生率高，数量多。
4.COL1及MMP7表达升高，COL4表达降低促进结直肠癌的侵袭转移。
5.辨证为虚证的中晚期肠癌患者，其癌旁组织表达更多的COL1，而实证组无该趋势；中晚期肠癌患者，无论辨证属虚或属实，其癌旁组织均表达更少的COL4及更多的MMP7。
临床研究部分：
①探讨虚实不同证候与不同病理分期结直肠癌的关联性；
②肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、癌抗原19-9(CA19-9)与炎性指标NLR在结直肠癌诊断及预后中的临床价值。
基础研究部分：
①通过分析距离结直肠癌癌灶旁不同部位组织中细胞外基质相关分子Ⅰ型胶原(COL1)、Ⅳ型胶原(COL4)及基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达差异，探讨肿瘤微环境理论下结直肠癌启动、侵袭、转移的分子机制，为结直肠癌的临床诊治提供一定的线索及寻找潜在的抗癌靶点；
②探讨结直肠癌中医辨证分型的分子基础，以期为制定结直肠癌个体化中西医结合治疗方案提供临床依据。
方法：
收集2019年4月-2019年10月于广州中医药大学第一附属医院肛肠科住院行手术治疗的45例结直肠癌患者的癌旁组织和远端正常组织及患者临床资料。
临床研究部分：分析患者术前肿瘤标志物CEA、CA19-9及炎性指标NLR与不同中医证型、不同临床病理特征的关系。
基础研究部分：癌旁组织取自距离癌灶1cm，远端正常组织取自距离癌灶8-10cm，取材深度达黏膜层及黏膜下层。HE染色法观察不同部位、不同病理分期肠组织的隐窝结构；免疫组化法检测不同部位、不同病理分期肠组织中细胞外基质分子COL1、COL4及MMP7的表达部位及表达量，进行差异分析及机制探讨。
结果：
1.随着肿瘤浸润深度增加、TNM分期增加，CEA随之增高(p＜0.05)；有淋巴结转移或远处脏器转移者，CEA值亦增高(p＜0.05)。
2.CEA与NLR联合检测具有较好的预测结直肠癌远处脏器转移的作用(P＜0.001)。
3.中医辨证为虚证的患者具有更高的CEA值(p＜0.05)。
4.HE染色：
①距离结直肠癌癌灶较远的远端正常组织中，隐窝结构相对正常，腺体紧密，排列整齐，腺腔单层排列，部分样本杯状细胞数量增多，分层排列；距离结直肠癌癌灶较近的癌旁组织中，异常隐窝病灶比例明显升高，柱状细胞及杯状细胞数量明显减少，排列紊乱，隐窝萎缩，有的隐窝结构完全消失，炎性细胞浸润增多，部分样本可见隐窝扭曲。
②非转移组的组织中，腺体排列整齐，致密，形态大致规则，部分样本腺体出现多量炎性细胞浸润；转移组的组织中，异常隐窝病灶比例明显升高，腺体形态不规则，细胞组分发生明显改变，核质比例增加，细胞核排列拥挤，腺腔柱状细胞及杯状细胞均减少，排列紊乱，隐窝明显萎缩，部分隐窝结构完全消失，丧失正常的组织结构。
5.免疫组化：
①COL1主要分布在黏膜层的隐窝之间以及黏膜下层的结缔组织之间。同非转移组(Ⅰ/Ⅱ期)相比，转移组(Ⅲ/Ⅳ期)肠组织中的COL1表达升高(P＜0.05)；癌旁组织中的表达量亦高于远端正常组织(P＜0.05)；
②COL4主要分布在黏膜层的腺管上皮的基底膜之间。同非转移组(Ⅰ/Ⅱ期)相比，转移组(Ⅲ/Ⅳ期)肠组织中的COL4表达降低(P＜0.05)；癌旁组织中的表达量亦低于远端正常组织(P＜0.05)；
③MMP7主要分布在肠上皮的胞膜及胞质。同非转移组(Ⅰ/Ⅱ期)相比，转移组(Ⅲ/Ⅳ期)肠组织中的MMP7表达升高(P＜0.05)；癌旁组织中的表达量亦高于远端正常组织(P＜0.05)；
④辨证属虚证组的患者中，与非转移者(Ⅰ/Ⅱ期)相比，出现转移者(Ⅲ/Ⅳ期)，COL4表达降低，COL1及MMP7表达升高(P＜0.05)；辨证属实证组的患者中，与非转移者(Ⅰ/Ⅱ期)相比，出现转移者(Ⅲ/Ⅳ期)，COL4表达降低，MMP7表达升高(P＜0.05)；而辨证属实证者，COL1表达与转移情况的差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.联合检测肿瘤标志物及炎性指标可提高结直肠癌诊断率，预测结直肠癌患者是否伴有远处脏器转移并指导术后复查频率。
2.正气不足与结直肠癌患者血清CEA值高表达相关。
3.靠近肿瘤部位以及伴有淋巴结或远处脏器转移患者的肠黏膜组织，其隐窝结构损害大，异常隐窝灶发生率高，数量多。
4.COL1及MMP7表达升高，COL4表达降低促进结直肠癌的侵袭转移。
5.辨证为虚证的中晚期肠癌患者，其癌旁组织表达更多的COL1，而实证组无该趋势；中晚期肠癌患者，无论辨证属虚或属实，其癌旁组织均表达更少的COL4及更多的MMP7。