轴突导向因子Slit及其受体Robo在损伤周围神经的表达差异及其功能

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Slit为中枢神经系统中线胶质细胞所分泌的一类可扩散的大分子蛋白质,具有排斥发育中的神经生长锥,诱导细胞迁移,促进轴突生长与分支形成的作用。Robo属于细胞粘附分子(cell adhesionmolecules,CAMs)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)超家族成员,为跨膜受体蛋白,介导Slit对生长锥和神经元的排斥作用,参与调控发育中的中枢神经轴突定向,同时Robo也具有同亲和附着与异亲和附着特性,可促进轴突生长和调控神经纤维束化、定位。有关Slit及Robo在成年动物周围神经系统中的分布与功能报道极少。同时,周围神经再生特异性(再生轴突生长定向)的细胞与分子机制尚不明确。 目的:研究Slit、Robo基因和蛋白质在成年大鼠脊髓、脊神经节(dorsal root ganglian,DRG)、坐骨神经(sciatic nerve,SN)的表达差异及损伤后的变化,探讨它们在神经损伤再生过程中的作用,揭示Slit、Robo的生理功能和周围神经再生特异的分子机制。 材料与方法:SD大鼠坐骨神经切断或脊神经后根切断后,存活3、7、14、21、28 d,取其相应节段脊髓、后根、DRG和损伤神经的远、近端;利用RT-PCR、原位杂交、免疫组织化学等方法检测Slit1、Slit2、Robo1、Robo2在上述组织中的表达。进而利用坐骨神经压榨(sciatic nerve crush,SNC)和切断后立即缝合(end to end suturetransected sciatic nerve,SNS)模型,将可溶性Robo1-Fc融合蛋白注入到损伤或缝合部位,形成坐骨神经压榨实验组(SNCE)和坐骨神
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