【摘 要】
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目的：建立大鼠脓毒症模型，观察不同时间点大鼠肝脏髓样分化蛋白2(Myeloid Differential protein-2 MD2)表达情况和NF-κB含量动态变化，并给予外源性TGFβ1干预，探讨TGFβ1对大鼠脓毒症的作用及可能机制，为临床脓毒症的治疗提供思路。方法：1、动物分组：健康雄性CL级SD大鼠120只，体重在220-250g，随机编号分为三组。对照组(假手术组)：40只，按2h、6
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目的：
建立大鼠脓毒症模型，观察不同时间点大鼠肝脏髓样分化蛋白2(Myeloid Differential protein-2 MD2)表达情况和NF-κB含量动态变化，并给予外源性TGFβ1干预，探讨TGFβ1对大鼠脓毒症的作用及可能机制，为临床脓毒症的治疗提供思路。
方法：
1、动物分组：健康雄性CL级SD大鼠120只，体重在220-250g，随机编号分为三组。对照组(假手术组)：40只，按2h、6h、12h、24h、48h时间点再分为5组，每组各8只。模型组(脓毒症模型组)：40只，按2h、6h、12h、24h、48h时间点再分为5组，每组各8只：建立盲肠结扎穿孔模型(Cecal Ligation and Puncture CLP)，于造模后0.5h尾静脉注射生理盐水1ml/250g。TGFp组(TGFβ干预组)：40只，按2h、6h、12h、24h、48h时间点再分为5组，每组各8只：建立盲肠结扎穿孔(CLP)模型，于造模后0.5h尾静脉注射TGFβ1 20ng/ml·250g。
2、标本取材：在各个时间点活杀大鼠，无菌取肝脏存放于离心管中，-80℃冰箱保存。待逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction RT-PCR)及免疫酶联吸附法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay ELISA)检测使用。10％福尔马林溶液固定肝脏组织，常温保存，病理切片HE染色用。
3、结果检测：HE染色光镜观察肝脏组织形态改变：用ELISA法测肝脏组织匀浆上清液NF-кB含量；RT-PCR法检测肝脏MD2mRNA的表达。
结果：
1、病理HE染色结果：对照组肝脏组织基本正常；模型组较对照组组织损伤严重，炎症细胞浸润多，伴有出血；TGFβ组较对照组仍有炎细胞浸润，但较模型组炎症细胞浸润减少，损伤减轻。
2、ELISA法检测NF-κB结果：NF-κB在对照组各个时间点之间无差异；模型组(6h、12h、24h、48h)较对照组含量明显增加，差异有统计学意义(p<0.05)，并且在24h达到最高，48h进入平台期。TGFβ组(6h、12h、24h)较模型组含量减少，差异有统计学意义(p<0.05)。
3．RT-PCR结果：MD2mRNA在对照组有少量表达，各个时间点之间无差异；在模型组(6h、12h、24h、48h)较对照组表达明显增加，差异有统计学意义(p<0.05)，并且在24h表达达到最高，48h进入平台期：TGFβ组(12h、24h)与模型组比较表达减少，差异有统计学意义(p<0.05)。
结论：
1、MD2mRNA在正常生理条件下可少量表达，脓毒症时表达明显增加，提示LPS信号转导增强。
2、脓毒症大鼠模型组NF-κB含量增加，提示炎症介质释放增加，炎症反应失控。
3、外源性应用TGFβ后，使脓毒症大鼠肝脏MD2表达减少，NF-κB含量减少，提示TGFβ可能通过抑制LPS的信号转导，减轻炎症反应。但是TGFβ的抗炎症作用有限。
4、TGFβ可为临床治疗脓毒症提供重要的思路及理论依据。
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