论文部分内容阅读
目的:研究西格列汀对1型糖尿病（T1DM）小鼠肾脏损伤的影响及机制。方法:30只CD1小鼠随机分为正常对照组（NC组）和实验组（EXP组）。EXP组小鼠采用一次腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1)诱导糖尿病（diabetes mellitus,DM）。注射后72小时及其后一周血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病模型成立。成模后的小鼠,随机分为糖尿病组（DM组）和西格列汀（sitagliptin,SIT）干预组（SIT组）。SIT组给予SIT 15 mg·kg-1·d-1,持续灌胃给药4周。DM组和NC组给予等体积的超纯水。在实验结束时,留取血清用于检测尿素氮（BUN）和肌酐（Scr）。实时荧光定量PCR法检测肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3、FN、CTGF和α-SMA的mRNA水平,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1、Smad2/3、FN、α-SMA、Collagen I及Collagen IV纤维化相关因子蛋白表达,Western blot法检测肾组织TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、FN及α-SMA蛋白含量。HE、PAS、Sirius Red染色观察肾组织形态学改变、糖原及胶原沉积。结果:与NC组比较,SIT组和DM组小鼠血糖均明显升高（P<0.001）;随着时间延长,SIT组血糖无降低,与DM组无差异（P>0.05）。实验结束时,SIT组24h尿微量白蛋白（2.46±0.97）与DM组24h尿微量白蛋白（11.96±3.36）比较,明显降低（P<0.001）。与DM组BUN（26.08±4.65）和Scr（352.58±47.09）比较,SIT组BUN（10.40±2.47）和Scr（238.51±53.03）显著降低（P<0.01）。DM组肾指数（21.43±2.16）与SIT组肾指数（15.14±4.14）相比,明显升高（P<0.05）。与NC组相比,DM组TGF-β1、Smad2、Smad3、FN、CTGF和α-SMA的mRNA表达均有所增高（P<0.05）,SIT组的以上纤维化相关因子的mRNA的表达与DM组比较,都有一定程度的降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与NC组相比,DM组小鼠肾组织中FN、Smad2/3、p-Smad2/3、TGF-β1和α-SMA蛋白含量显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与DM组相比SIT组小鼠肾组织FN、Smad2/3、p-Smad2/3、TGF-β1、α-SMA、Collagen I及Collagen IV蛋白含量显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.西格列汀不降低链脲佐菌素诱导的T1DM小鼠血糖水平。2.西格列汀延缓链脲佐菌素诱导的T1DM小鼠肾组织结构及功能的损伤。3.西格列汀可能通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路阻止链脲佐菌素诱导的T1DM小鼠肾损伤的发生发展。