【摘 要】
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目的:本研究探讨布托啡诺对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、转移和凋亡的影响及其作用机制,揭示布托啡诺作为麻醉镇痛药的辅助抗肿瘤潜力。方法:1、使用CCK8法检测不同浓度的布托啡诺作用于胰腺癌PANC-1细胞IC50（半抑制浓度）。2、根据得出的布托啡诺24h和48h半数抑制浓度（IC50）后将后续用药进行分组,使用CCK8法检测布托啡诺对胰腺癌PANC-1增殖能力的影响。3、通过流式细胞术测定布托啡
【基金项目】
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湖南省科技厅创新课题（编号2018SK51702）；
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目的:本研究探讨布托啡诺对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、转移和凋亡的影响及其作用机制,揭示布托啡诺作为麻醉镇痛药的辅助抗肿瘤潜力。方法:1、使用CCK8法检测不同浓度的布托啡诺作用于胰腺癌PANC-1细胞IC50（半抑制浓度）。2、根据得出的布托啡诺24h和48h半数抑制浓度（IC50）后将后续用药进行分组,使用CCK8法检测布托啡诺对胰腺癌PANC-1增殖能力的影响。3、通过流式细胞术测定布托啡诺对胰腺癌PANC-1细胞凋亡的影响。4、通过Transwell侵袭实验检测布托啡诺对胰腺癌PANC-1细胞侵袭能力的影响。5、通过划痕实验检测布托啡诺对胰腺癌PANC-1细胞迁移能力的影响。6、Western blot蛋白免疫印迹实验检测布托啡诺处理胰腺癌PANC-1细胞后上皮间质相关蛋白表达的变化。7、Western blot蛋白免疫印迹实验和q RT-PCR实验检测布托啡诺处理胰腺癌PANC-1细胞后TGF-β1和Smad4蛋白质和m RNA表达的变化。结果:1、CCK8实验结果显示布托啡诺作用于胰腺癌PANC-1细胞24h的IC50为155.5μM,48h的IC50为128.6μM。2、与空白对照组比较,布托啡诺处理能显著抑制胰腺癌细胞增殖能力,并呈浓度和时间依赖关系。3、布托啡诺可以诱导胰腺癌细胞发生凋亡,呈现浓度依赖关系。4、Transwell实验显示布托啡诺能抑制胰腺癌PANC-1细胞的侵袭能力,并呈浓度依赖性。5、划痕实验显示布托啡诺能抑制胰腺癌PANC-1细胞的迁移能力,并呈浓度依赖性,。6、Western blot蛋白免疫印迹实验检测布托啡诺干预后胰腺癌细胞的EMT相关上皮蛋白E-cadherin表达升高,间质蛋白N-cadherin、Vimentin表达降低。7、Western blot蛋白免疫印迹实验检测布托啡诺处理24h能下调胰腺癌PANC-1细胞转化生长因子TGF-β1的表达,上调Smad4蛋白的表达;q RT-PCR实验结果显示布托啡诺处理胰腺癌细胞后的TGF-β1m RNA表达下降,Smad4 m RNA表达上调。结论:1、布托啡诺可以抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化,诱导胰腺癌PANC-1细胞发生凋亡,其作用机制与TGF-β1/Smad4信号通路有关。
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