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纯化和冷冻干燥是重组蛋白质生产中的两种关键工艺。为了建立两种工艺的条件,我们采用HSP-MUC1和FMDV-VP1分别对重组蛋白的纯化和冻干条件进行了实验研究。HSP-MUC1是将BCG来源的HSP65基因与人MUC1的CTL表位基因融合,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达获得的重组融合蛋白。HSP-MUC1的纯化有非变性和变复性两种方式。为了研究这两种纯化方法对蛋白活性的影响,我们首先摸索并建立了变复性纯化的实验室工艺,主要步骤是:6mol/L尿素裂菌变性;Q-Sepharose层析用含50mmol/L~200 mmol/L NaCl的缓冲液线性梯度洗脱;两次透析复性;Phenyl-Sepharose层析用含0.9mol/L NaCl的缓冲液洗脱杂蛋白,用含0.165mol/L NaCl的缓冲液洗脱HSP-MUC1;Q-Sepharose层析除内毒素时用含0.3mol/L NaCl的缓冲液洗脱HSP-MUC1。最终获得的HSP-MUC1的纯度为92%并且对小鼠脾细胞有增生作用。FMDV-VP1是根据口蹄疫病毒VP1蛋白B细胞表位设计的、在大肠杆菌中表达的一种重组口蹄疫病毒疫苗。我们用德国的CHrist ALPHA 1-2 LD型实验室冻干机建立了FMDV-VP1实验室冻干流程;对冻干保护剂进行了研究且确定了FMDV-VP1的冻干保护剂的种类和浓度:甘露醇(30 mg/ml),甘氨酸(5 mg/ml),尿素(0.3mol/L),PBS(0.3mol/L,pH=7.8);建立了FMDV-VP1实验室冻干流程。