种植体周围炎条件下成骨细胞增殖分化功能研究

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种植体周围炎是口腔种植中常见的并发症,是一种通常发生在正常行使功能的骨性结合种植体周围组织的慢性进展性边缘炎症,可以导致种植体周围支撑骨组织的功能丧失。研究显示,种植体周围炎是导致种植体松动失败的重要原因之一。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化,在种植体骨结合中起到重要的作用。现有文献认为,种植体周围炎发生时,炎症因子影响了成骨细胞与破骨细胞的平衡状态,导致种植体松动失败。本实验采用炎症微环境条件下的颌骨成骨细胞,观察炎症微环境条件下的颌骨成骨细胞增殖分化能力等生物学功能,并比对正常条件下颌骨成骨细胞增殖分化能力,了解种植体周围炎的炎症微环境对颌骨成骨细胞生物学功能的影响。为研究种植体周围炎造成骨吸收之后如何恢复骨结合提供理论依据。第一部分种植体周围炎龈沟液与正常牙龈沟液中炎症细胞因子与活性酶测定目的:从临床上收集病例,测定种植体种植体周围炎龈沟液与正常牙龈沟液中炎症细胞因子与活性酶水平。方法:从临床上收集因种植体周围炎导致种植失败,种植体需要拔除的种植体周围炎病人和接受第三磨牙拔除术的患者,检测相应龈沟液中的炎症细胞因子及酶活性水平。结果:发生种植体周围炎的牙位周围龈沟液TNF-α、IL-6、ALP和AST的水平高于健康天然牙周围龈沟液。结论:TNF-α、IL-6、ALP和AST可以作为评价种植牙周围感染与炎症情况的重要指标。第二部分炎症组织及正常组织来源成骨细胞的鉴定与增殖能力的比较目的:分离、培养、纯化炎症组织及正常组织来源的成骨细胞,并对这两种来源的成骨细胞的增殖能力进行比较。采用碱性磷酸酶及茜素红染色对其进行鉴定。方法:从临床上收集因种植体周围炎导致种植失败,种植体需要拔除的种植体周围骨组织和接受第三磨牙拔除术的患者第三磨牙周围骨组织。采用改良后的组织块法,分离培养炎症组织来源的成骨细胞和正常组织来源的成骨细胞,采用反复贴壁法对其进行纯化。采用噻唑蓝(MTT)法检测其增殖能力,使用碱性磷酸酶试剂盒及茜素红染色对纯化后的成骨细胞进行鉴定。结果:得到了纯化后的炎症组织来源成骨细胞和正常组织来源的成骨细胞,碱性磷酸酶及茜素红染色鉴定结果显示阳性。噻唑蓝(MTT)法检测结果显示炎症组织来源的成骨细胞的细胞增殖活力显著低于正常组织来源的成骨细胞。结论:改良后的组织块法和反复差速贴壁法能够得到纯化的炎症组织来源的成骨细胞和正常组织来源的成骨细胞。种植体周围炎的炎症微环境降低了成骨细胞的增殖能力第三部分种植体周围炎的炎症微环境对颌骨成骨细胞分化能力的影响目的:鉴定来自于种植体周围炎炎症组织和正常组织的成骨细胞的分化能力。方法:采用RT-PCR技术检测两种不同组织来源成骨细胞OCN,Runx2,Col-1的表达。Western Blots检测两种不同组织来源成骨细胞OCN的表达。结果:RT-PCR结果显示炎症组织来源的成骨细胞的OCN,Runx2,Col-1等相关基因的表达明显低于正常组织来源的成骨细胞。Western blots结果显示炎症组织来源的成骨细胞的OCN表达水平明显低于正常组织来源的成骨细胞。结论:种植体周围炎的炎症微环境降低了成骨细胞的分化能力
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