【摘 要】
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海南根瘤菌(Rhizobium hainanense)I66分离自中国海南海.以I66的总DNA为模板,再以该引物进行PCR扩增,得到约700bp的片段,证明所得片段为I66 nod D基因的一部分.用Sac I完全酶
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海南根瘤菌(Rhizobium hainanense)I66分离自中国海南海.以I66的总DNA为模板,再以该引物进行PCR扩增,得到约700bp的片段,证明所得片段为I66 nod D基因的一部分.用Sac I完全酶切I66的总DNA后,得到6个阳性克隆,选取其一命名为pUCTD,测定结果显示为,I66 nod D基因与S.meliloti nod D基因高度同源.回收SacI酶切后2.2kb大小的插入片段,将其连接到具有广泛寄主的载体pBBR1MCS-5上,筛选转化子,经酶切验证,得到pUCTD-1.三亲本杂交把质粒pUCTD-1转入豌豆根瘤菌蚕豆生物型LPR5045中进行黄酮诱导试验,结果,所得的接合子能在含有毛地黄黄酮的FY平板上呈现蓝色,说明I6的nodD基因能接受苜蓿分泌的毛地黄黄酮的诱导,激活其他结瘤基因的转录,其NodD蛋白具有结瘤调节的功能.
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