运用RNA指纹技术分析神经元分化发育成熟基因表达变化及相关基因的分离和鉴定

来源 :中国科学院上海脑研究所 中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:icetuping
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该实验从怀孕16天的ICR小鼠的胎鼠大脑皮层中分离并培养神经元前体细胞,这些细胞分化并发育成熟为GABA能神经元.该实验运用了RAP-PCR技术分析了培养的神经元在发育分化各过程中.经过与NCBI基因库和EST库比较,发现其中2个是已知基因片断,3个是已知EST片断,6个与已知基因或EST有较高的同源性,而11个与已知基因或EST同源性很低或没有同源性.根据这些EST序列,通过EST拼装和PCR还克隆了3个新基因的全长.针对分离出的ESTs和克隆了的基因,我们分析研究了他们在小鼠神经元和脑中表达特征,还对他们的功能进行了初步的研究和探索.基因7-12长1.8kb,经与数据库比较,没有发现它和任何已知基因有同源性.实验中还克隆了小鼠SynapticGlycoproteinSC2,并发现了它的一个的剪接体.小鼠Reticulon1-C基因特异性在神经组织表达,多种生长因子可能影响其表达.在实验中还分离了一个属于Frizzled蛋白家族的基因片断,它和神经系统的早期发育相关,另外还分离了一个锌指蛋白片断,它在神经系统大量表达.这些工作促进了对小鼠神经元发良相关基因的了解,对它们的分析有助于了解神经系统的发育过程.
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