高温高湿环境下运动对大鼠肠黏膜屏障功能的影响

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目的:构建劳力型热射病大鼠模型,检测肠黏膜屏障的相关指标,探讨高温高湿环境下运动对大鼠肠黏膜屏障功能的影响。方法:建立动物模型:经过跑步训练,挑选能够在跑步机上正确跑步运动的SD大鼠30只,随机分成正常对照组、常温常湿运动组、高温高湿运动组,每组各10只。高温高湿运动组在温度35±2℃、湿度80%±10%的条件下进行跑步运动,跑步机速度为28 m/min,直肠温度达标确认劳力型热射病大鼠模型建立成功。常温常湿运动组在室温25±2℃、湿度60%±5%的条件下正常跑步运动,跑步机速度为28 m/min,时间随机匹配高温高湿运动组大鼠的运动时间。正常对照组在常温常湿环境下饲养,不进行跑步运动。检测观察指标:(1)酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血浆内毒素(LPS)、二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸(DLAC)水平。(2)常规H-E染色观察回肠黏膜组织的病理改变。(3)粪便标本进行细菌16S r RNA测序分析,对比各组大鼠的肠道菌群丰度、多样性及结构差异。结果:(1)高温高湿运动组大鼠均成功建成劳力型热射病模型,肛温均达到42.5℃以上,肛温为42.6±0.1℃,运动时间为48.5±18.3 min。而在相同的运动时间内,常温常湿运动组大鼠的肛温为38.4±0.5℃,两组肛温有显著性差异(t=25.1,P<0.001)。(2)正常对照组血浆LPS水平为1258.981±278.233pg/ml,常温常湿运动组为2024.115±373.512 pg/ml,高温高湿运动组为2459.268±448.608 pg/ml,三组间LPS水平比较存在差异(F=26.490,P<0.001)。运动后血浆LPS水平明显升高,常温常湿运动组及高温高湿运动组与正常对照组相比差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001),高温高湿运动组升高更加显著,与常温常湿运动组相比,差异具有统计学意义(P=0.038)。(3)三组大鼠间血浆DAO、DLAC水平存在差异(DAO Welch F=173.524、P<0.001,DLAC Welch F=14.318、P<0.001)。运动后血浆DAO水平均有明显升高,常温常湿运动组及高温高湿运动组与正常对照组相比差异均有统计学意义(452.047±180.601 vs 287.404±38.688、P=0.045,885.138±91.546 vs287.404±38.688、P<0.001)。运动后血浆DLAC水平均有明显升高,常温常湿运动组及高温高湿运动组与正常对照组相比差异均有统计学意义(1.502±0.211 vs 1.308±0.081、P=0.048,1.911±0.375 vs 1.308±0.081、P<0.001)。其中高温高湿运动组升高更加显著,与常温常湿运动组相比,差异均具有统计学意义(DAO P0.05)。三组肠道菌群的β-多样性比较,通过PCo A主坐标分析得出三组样品组间各自形成聚类,具有各自的特征。在门水平上,高温高湿运动组变形菌门丰度升高;在科水平上,高温高湿运动组肠杆菌科及链球菌科丰度明显升高,乳杆菌科及双歧杆菌科丰度明显降低;在属水平上,高温高湿运动组枸橼酸杆菌及链球菌丰度明显升高,乳酸杆菌及双歧杆菌丰度明显降低(P<0.05)。相比正常对照组,常温常湿运动组肠杆菌科及链球菌科丰度有升高的趋势,乳杆菌科及双歧杆菌科丰度有降低的趋势。结论:1、高温高湿环境下运动,大鼠血浆DAO、DLAC水平明显升高,提示肠黏膜损伤、通透性增加是肠源性内毒素血症发生的重要的途径。2、高温高湿环境下运动,大鼠肠黏膜通透性增加,肠道菌群紊乱,乳酸杆菌及双歧杆菌等有益菌比例下降,肠杆菌科等有害菌比例上升,导致内毒素血症,提示肠黏膜屏障功能受损是劳力型热射病的重要发病机制。
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