【摘 要】
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目的:内质网相关降解（ERAD）系统在肿瘤代谢中起重要作用,Sel1L是ERAD系统核心基因之一,目前已报道其低表达促进乙肝病毒复制、且对Hep G2细胞线粒体功能和代谢有影响,但就其在肝癌中的表达及影响尚不清楚。本研究旨在探索Sel1L在肝癌组织的表达、及其对Hep G2细胞迁移侵袭、脂代谢的影响,为靶向治疗肝癌提供依据。方法:首先通过生物信息学、免疫组化、western blotting等方法
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目的:内质网相关降解（ERAD）系统在肿瘤代谢中起重要作用,Sel1L是ERAD系统核心基因之一,目前已报道其低表达促进乙肝病毒复制、且对Hep G2细胞线粒体功能和代谢有影响,但就其在肝癌中的表达及影响尚不清楚。本研究旨在探索Sel1L在肝癌组织的表达、及其对Hep G2细胞迁移侵袭、脂代谢的影响,为靶向治疗肝癌提供依据。方法:首先通过生物信息学、免疫组化、western blotting等方法分析Sel1L基因在肝癌和癌旁组织中m RNA和蛋白表达水平;其次通过构建Hep G2细胞Sel1L敲除细胞系,进行细胞划痕,Transwell实验检测Sel1L敲除后对Hep G2细胞迁移、侵袭的影响,并通过免疫荧光、扫描电镜观察细胞器的变化;最后应用液质联用质谱检测Sel1L敲除后Hep G2细胞中脂质组学变化,从而分析Sel1L敲除影响脂质代谢在肝癌发生发展中的作用。所测得的脂质组学数据用Graph Pad Prism 8.01分析并以图片展示。P＜0.05具有统计学意义。结果:1.通过生物信息学分析发现,在m RNA水平上,肝癌组织与癌旁组织中Sel1L表达差异不显著（P=0.149）;组织芯片和Western Blotting结果显示,Sel1L蛋白在肝癌组织中高于癌旁组织,且与乙肝携带相关;2.Transwell和划痕实验结果显示,Sel1L敲除后促进Hep G2细胞的迁移和侵袭,免疫荧光和电镜结果显示内质网和线粒体结构发生改变;3.脂质组学结果发现,鞘脂、磷脂、胆固醇脂、游离脂肪酸、均不同程度发生了改变,这可能与Sel1L敲除后导致细胞器结构形态变化、及改变细胞迁移侵袭等性状有关;结论:在肝细胞癌组织中,Sel1L m RNA水平变化没有统计学意义,但其蛋白表达显著上升,且Sel1L敲除增强Hep G2细胞的迁移/侵袭能力,细胞器形态发生变化,这可能与Sel1L敲除影响脂质代谢,导致代谢信号通路变化、细胞质膜组成改变有关。提示Sel1L可作为肝癌防治的重要靶基因深入研究。
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