论文部分内容阅读
背景特发性IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN),是儿童常见的原发性肾小球肾炎,是一种以肾小球系膜区IgA沉积为主的临床病理综合征,常表现为急性上呼吸道或消化道感染后出现发作性肉眼血尿。早期研究学者认为此病是良性疾病,临床呈慢性进展,预后良好,但目前众多的资料显示约20%-40%的患者在确诊后的20年内进展到终末期肾脏病(ESRD),需要肾替代治疗,对儿童的生活质量及生命造成了严重威胁,故有必要对IgAN采取干预治疗,然而目前由于IgAN发病机理尚未完全清楚,IgAN的治疗方案有限,因此有必要探究IgAN的发病机制。研究表明,IgAN处理来自常见致病菌的共同外源性抗原失调,可引起异常的免疫反应、异常IgA的合成及肾损害,但具体通过何种途径导致免疫失衡仍不清楚。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一种新型的、保守的模式识别受体,可表达于内皮细胞、免疫细胞和肾脏固有细胞等,识别病原体相关分子模式和损伤相关分子模式等,通过髓样分化因子-88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)依赖信号传导通路和MyD88非依赖信号传导通路,激活核转录因子(nuclear factor,NF)-κB,引起细胞因子、趋化因子等表达增加,同时启动天然免疫和适应性免疫应答与炎症反应,成为感染性或非感染性肾脏病研究的热点。我们前期研究了TLR4和TLR7在儿童原发性肾病综合征患儿肾组织中的表达变化,证实了TLR4和TLR7参与儿童原发性肾病综合征的发病。那么TLRs是否参与IgAN的发病过程?IgAN是否存在TLRs的异常变化?目的探讨TLR3和TLR4在儿童特发性IgAN外周血单个核细胞及肾组织中的表达,为儿童IgAN的发病机制提供实验依据,同时为IgAN的治疗提供新靶点。方法收集2014年09月至2016年06月于我院儿科就诊且经肾穿刺活检,最后确诊的IgAN患者34例为IgAN组,同期在我院小儿外科行肾脏切除的肾肿瘤患儿7例为对照A组;以10例门诊健康体检儿童为对照B组。采用免疫组织化学法检测IgAN组与对照A组肾组织中TLR3和TLR4的表达情况;同时采用流式细胞术检测TLR3和TLR4在IgAN组与对照B组外周血单个核细胞中的阳性表达率。对TLR3和TLR4在IgAN组与对照组的阳性表达情况进行分析,研究IgAN患者中TLR3和TLR4的表达情况。结果1.外周血单个核细胞中TLR3和TLR4的表达:TLR3在对照B组外周血单个核细胞中几乎没有表达,而在IgAN组则呈现出明显的高表达,TLR4在对照B组外周血单个核细胞中有少量的表达,而在IgAN组的表达明显升高。IgAN组外周血单个核细胞中TLR3和TLR4的阳性表达率分别为(17.62±8.33)%和(23.85±11.82)%,均明显高于对照B组中TLR3(0.31±0.06)%和TLR4(3.02±0.09)%的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。2.肾组织TLR3和TLR4表达:TLR3、TLR4在肾组织的表达分别为胞核表达和胞浆表达。对照A组:肾小管上皮细胞有少量的TLR3表达,而肾小球中几乎无TLR3表达,TLR4在肾小管及肾小球中均无明显表达。IgAN组:TLR3和TLR4在肾小管上皮细胞均呈高表达,而肾小球系膜细胞有不同程度TLR3和TLR4表达。IgAN组肾组织中TLR3和TLR4的表达分别为(68.28±6.37)%和(0.048±0.018),均明显高于对照A组肾组织中TLR3(9.69±11.02)%和TLR4(0.003±0.001)的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论1.TLR3和TLR4在IgAN肾组织及外周血单个核细胞中表达均增加,提示TLR3和TLR4异常活化可能参与了IgAN的发病过程。2.根据TLR3和TLR4两种受体的主要识别配体类型,推断病毒及细菌感染可能通过免疫作用引起IgAN的肾损害。