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背景与目的： microRNAs是一类高度保守的、非编码内源性小RNA分子，对机体正常的生长发育及疾病的发生发展起着重要的作用。Let-7家族成员对骨髓间充质干细胞（MSCs）的分化起着重要的作用，了解微小RNA let-7d对MSCs向神经细胞分化的影响可以促进颅内干细胞移植的发展。本文通过体外构建let-7d慢病毒载体并转染MSCs来探讨let-7d在MSCs向神经细胞分化过程中的作用。 方法： 1.构建大鼠慢病毒载体，分别为转染空白慢病毒、转染let-7d目的基因，转染抑制let-7d表达的目的基因，并用这些慢病毒载体转染大鼠MSCs；根据转染的慢病毒载体的不同，实验分为4个组：即转染上调组(转染let-7d-LV)、转染下调组(转染let-7d-inhibition-LV)、阴性对照组(转染空白慢病毒)、未转染组。 2.MTT法检测转染后细胞的存活率。 3.采用法舒地尔诱导转染后的各组MSCs促使其分化为神经细胞， 4.以免疫细胞化学法检测分化后细胞表面NSE、MAP-2的表达变化，以确定MSCs已分化为神经细胞； 5.应用RT-PCR、Western bolt法检测分化后神经细胞MAP-2 mRNA的表达量，以确定MSCs分化为神经细胞的效率； 结果： 1.在倒置荧光显微镜下观察到转染的MSCs有荧光显示，提示let-7d慢病毒载体转染成功。各组之间细胞的荧光强度无明显差异，提示不同组别之间细胞的转染效率无明显差异。 2.MTT法检测细胞存活率，发现转染上调组、转染下调组及阴性转染组的细胞存活率之间无显著差异(P＞0.05)，但此三组细胞存活率均低于未转染组。 3.在转染后的各组细胞之间加入法舒地尔，发现细胞形态发生变化，免疫细胞化学法发现高表达神经元标志物NSE、MAP-2，表明法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化。 4.免疫细胞化学法发现转染上调组细胞的NSE、MAP-2的荧光强度高于阴性对照组和转染下调组(P＜0.05)，而转染下调组细胞的NSE、MAP-2的荧光强度低于阴性对照组和转染下调组(P＜0.05)。 5.RT-PCR法检测MAP-2 mRNA表达量，发现转染上调组细胞的MAP-2表达量高于阴性对照组和转染下调组(P＜0.05)，而转染下调组细胞的MAP-2表达量低于阴性对照组和转染下调组(P＜0.05)。 结论： 1.let-7d慢病毒载体可以在体外转染大鼠MSCs，并且可以用于实验研究。 2.let-7d可以促进MSCs向神经细胞的分化，通过控制let-7d的表达可以影响MSCs向神经细胞的分化效率。