论文部分内容阅读
真海鞘(Halocynthia roretzi Drasche)属于脊索动物门(Chordates)、尾索动物亚门(Urochordata)、海鞘纲(class Ascidiacea),在我国渤海、黄海海域具有广泛分布。本研究以真海鞘壳为实验原料进行了其浸膏提取工艺、化学成分分离鉴定以及生物活性的研究。真海鞘壳分别用60%、75%、95%乙醇加热回流提取制备浸膏,其中75%乙醇浸提提取的浸膏得率为10.40%,香草醛-硫酸法测定结果表明浸膏中皂苷含量为14.3%,L-B反应及泡沫实验均表明浸膏中含有甾体类物质。真海鞘壳浸膏用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到3部分提取物,即PEE、ETA和BUA。采用薄层层析、反复硅胶柱层析、制备薄层色谱层析(p TLC)、Sephadex LH-20凝胶柱层析及重结晶等技术,分别对石油醚萃取部分(PEE)、乙酸乙酯萃取部分(ETA)和正丁醇萃取部分(BUA)进行分离纯化。从石油醚萃取部分分离得到化合物HRA及HRB,根据理化性质、波谱分析和文献对照的方法对其进行结构鉴定,分别鉴定为已知化合物diethyl 24-[(Z)-3-methy-1-hexenyl]-heptatetracontanedioate(HRA)和胆甾醇(HRB)。从正丁醇萃取部分(BUA)分离纯化得到化合物HRC,鉴定为6-(2,,3,-dihydroxy-4,-hydroxymethyl-tetrahydro-furan-1,-yl)cyclopentadiene[c]pyrrole-1,3-diol。HRA和HRC为首次从海鞘壳中分离得到的化合物。真海鞘壳浸膏及有机溶剂萃取部分抑菌活性研究表明,乙酸乙酯层萃取部分对金黄色葡萄球菌具有显著的抑制效果,其它有机溶剂萃取部分对大肠杆菌、产气杆菌、枯草芽孢杆菌、希瓦氏菌均具有不同程度的抑制作用。真海鞘壳浸膏各有机溶剂萃取部分具有清除超氧阴离子(02·–)、DPPH自由基以及羟基自由基(·OH)的作用,且具有浓度依赖性。乙酸乙酯萃取部分和正丁醇层萃取部分表现出较强的抗氧化活性。用75%乙醇提取的真海鞘壳总浸膏对3种肿瘤细胞(人胃癌细胞AGS、人肝癌细胞Hep G2、人卵巢癌细胞SKOV3)进行抑制活性测试,结果表明随着真海鞘壳总浸膏浓度的逐渐升高,3种细胞增殖速率降低。表明真海鞘壳总浸膏对3种癌细胞均具有毒性作用。真海鞘壳总浸膏对Hep G2细胞具有显著抑制作用,且有剂量依赖性。这提示我们进一步研究,可以获得潜在的具有抑制Hep G2细胞的化学成分。