近年来,随着抗菌药物的普遍使用甚至滥用,细菌多重耐药情况越来越严重,临床上可供选择用于治疗肠杆菌科细菌感染的药物越来越少。磷霉素作为老药,因其独特的抗菌机制,不与其他药物发生交叉耐药,且对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有良好的抗菌活性,因此又重新引起人们的关注。但随着磷霉素越来越广泛的应用,其耐药情况也日益严重,目前有关质粒介导的磷霉素耐药基因在沙门菌中传播的报道很少。本论文调查了质粒介导的磷霉素耐药基因fosA₃在食品动物源沙门菌中的流行状况,进一步研究了其遗传特征和播特特征,为控制和减少磷霉素耐药性的出现及其在兽医临床应用的风险评估提供参考依据。对本实验室2009²014年间保存的288株食品动物源沙门菌采用PCR方法进行磷霉素耐药基因fosA₃,fosA和fosC₂的检测,结果筛选得到6株（2.1%）fosA₃阳性沙门菌,均来自鸡粪便拭子样本。没有检测到fosA和fosC₂基因。采用琼脂稀释法测定6株fosA₃阳性菌株对17种抗生素的敏感性,结果显示所有菌株均表现出多重耐药,对头孢噻肟、头孢噻呋、头孢曲松、氨苄西林、氯霉素、氟苯尼考、卡那霉素、链霉素、环丙沙星、恩诺沙星、萘啶酸、以及四环素的耐药率高达100%。所有菌株均对庆大霉素、阿米卡星、头孢他啶和喹乙醇高度敏感。采用PCR方法检测fosA₃阳性沙门菌中超广谱β-内酰胺酶基因(bla_{CT X-M-1G}、bla_{CT X-M-2G}、blaCT X-M-8G、blaCT X-M-9G、blaCTX-M-25G、blaT EM、blaSHV、blaOXA)和floR基因,发现所有菌株同时携带bla_{CT X-M-9G}(均为bla_CTX-M-14)基因和floR基因。采用玻片凝集法确定其血清型,检测结果表明所有菌株均为印第安纳型。采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分型（MLST）分析菌株间的亲缘关系。PFGE结果显示6株fosA₃阳性菌株图谱相似,说明菌株间存在克隆传播;MLST结果表明6株菌均为ST17型。采用接合转移/转化、复制子分型、S1-PFGE和Southern杂交等对fosA₃基因的水平传播和质粒特征进行了分析。通过电转化方法得到6株fosA₃阳性转化子,且3株fosA₃阳性沙门菌中bla_{CT X-M-14}基因同fosA₃基因共同转移到受体菌中,复制子分型结果显示,6株fosA₃阳性菌中,1株携带IncA/C型质粒,5株均携带IncN和Inc A/C型复合型质粒。对转化子进行S1-PFGE分析,并分别与fosA₃、bla_{CT X-M-14}、IncN和Inc A/C探针进行Southern杂交,结果显示fosA₃位于两种大小不同的质粒上,IncA/C质粒大小约为80 kb,IncN和IncA/C型复合型质粒大小有两种情况,约为80 kb和170 kb。质粒分析结果表明fosA₃基因能通过IncN或Inc A/C型质粒与bla_{CT X-M}基因发生共同转移。采用PCR-mapping的方法对6株fosA₃阳性沙门菌株中的fosA₃基因上下游环境序列进行分析,结果显示所有的fosA₃基因两端都有IS26插入序列,其中3株菌的fosA₃基因上游还含有bla_{CT X-M-14}基因。通过生长曲线、稳定性试验和竞争试验分析携带有fosA₃基因和同时携带fosA₃、bla_{CT X-M-14}基因的质粒对宿主菌适应性的影响。结果表明质粒的存在对宿主菌的生长没有显著的影响,但仅携带有fosA₃基因的质粒在宿主中不稳定,在竞争中与宿主菌相比处于劣势,而同时携带fosA₃、bla_CTX-M-14基因的质粒能够在宿主菌中稳定存在,且在竞争试验中有竞争优势,没有产生较高的适应性代价。本研究首次在国内不同地区的鸡粪便拭子样本中分离得到的沙门菌中检测到fosA₃基因,菌株的克隆传播和fosA₃与bla_CTX-M-9G随质粒的水平传播都加速了耐药性的散播,fosA₃与bla_{CT X-M-14}基因共同发生转移的质粒可在宿主菌中稳定传播,能够提高菌株的竞争优势,对公共卫生构成潜在威胁。