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目前，乙型肝炎病毒感染是全球性公共卫生问题。近年来国内外有研究表明HBVpreSl是HBV与肝细胞的结合区，HBV preS1(前S1)5’端的短肽作为导向工具对于控制慢性乙型肝炎的蔓延有着潜在的意义。
目的：通过表达preS1片段与绿色荧光蛋白EGFP和preS1片段与干扰素的融合蛋白，研究preS1融合蛋白在原核和真核细胞中的表达效果，探讨preS1片段与干扰素融合作为肝细胞特异性导向药物的可行性。
方法：首先根据HBV(adw2亚型)preS1核苷酸序列，设计引物，用含HBV(adw2亚型)全长基因的质粒为模板，分别扩增HBV的preS1(a.a.2-48)、preS1(a.a.2l-48)的编码序列。将扩增后获得的preS1两个短肽的编码序列分别与EGFP和干扰素融合，克隆到原核表达载体以及真核表达载体上，以期获得高水平表达。观察preSl(a.a.2-48；21-48)-EGFP转染人肝癌细胞系HepG2后荧光蛋白在绌胞各部分(主要是细胞膜)的分布情况。用ELISA方法和荧光定量PCR方法分析preS1(a.a.2-48；21-48)-IFN转染HepG2.2.15细胞后对HBV分泌的抑制作用。采用Wish细胞-VSV病毒检测系统对preSl(a.a.2-48；21-48)-IFN进行生物学活性的检测。
结果：通过蛋白电泳分析表明， HBV preSl(a.a.2-48；21-48)-EGFP 和preSl(a.a_2-48；21-48)-IFN在大肠杆菌和酵母中未能检测到表达。通过荧光显微镜观察，表明preSl(a.a.2-48；21-48)-EGFP在人肝癌绌胞系HepG2中获得表达，preSl(a.a.2-48；21-48)-EGFP在HepG2细胞中表达的荧光蛋白主要集中在细胞质中。preSl(a.a.2-48；21-48)-IFN真核表达质粒转染HepG2.2.15绌胞后对HepG2.2.15分泌HBV有抑制作用。
结论： HBV preSl(a.a.2-48)、preS1(a.a.21-48)融合蛋白在原核和酵母系统中难以实现高效表达，但是可在真核细胞中有效表达。在人肝癌细胞系HepG2细胞中表达的preSl(a.a.2-48；21-48)-IFN融合蛋白具有抑制病毒的活性，值得进一步研究。本研究对preS1片断与干扰素融合作为肝细胞特异性的导向药物做了有益的探索。