三种冷杉属植物的化学成分与生物活性研究

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冷杉属植物的次生代谢产物中富含萜类化合物,这些萜类成分具有结构类型多、取代位置多、手性中心多、重排异构多的特点;同时本属植物的化学成分表现出多种生物活性,包括昆虫保幼活性、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗溃疡及中枢神经系统方面的活性等。为了从冷杉属植物中寻找更多的活性成分或先导化合物,我们选取中国特有的三种冷杉属植物冷杉(Abies fabri (Mast.) Craib)、紫果冷杉(Abies recurvata Mast.)、怒江冷杉(Abies nukiangensis C.Y.Cheng et L.K.Fu)的枝叶作为研究对象,首次进行化学成分和生物活性研究。本文采用各种现代分离纯化技术和波谱方法,对冷杉、紫果冷杉、怒江冷杉枝叶的95%乙醇粗提物进行系统的化学成分研究。我们分别从冷杉、紫果冷杉、怒江冷杉中分离鉴定了109,82,44个化合物。这些化合物除去共有成分,一共为185个化合物,含新化合物50个。这些化合物以萜类为主,其中三萜45个,二萜48个,倍半萜17个,单萜11个,四萜8个,五萜2个在本课题研究中,我们从冷杉(Abies fabri)中得到了8个四萜类化合物(AF-73-AF-80),结构很新颖,我们推测它们是以结构重排的羊毛脂甾烷型三萜(24E)-lanosta-8,24-diene-3,23-dion-26-oic acid和链状单萜为前体经Diels-Alder反应形成的,我们通过电子圆二色光谱(ECD)计算的方法确定了其绝对立体构型。此外,我们首次从冷杉属植物中分离、鉴定了2个五萜类化合物(AF-81-AF-82),这两个化合物的结构类型也很新颖,我们推测是由三萜和松香烷型二萜(abietane)为前体经Diels-Alder反应形成的,因为我们得到了其三萜前体化合物和许多结构相似的松香型二萜化合物。我们分别从冷杉(Abies fabri)和怒江冷杉(Abies nukiangensis)中发现了一个结构新颖的松香烷型降二萜(AF-26)和一个罕见的降三萜(AN-1),这个降二萜的特征在于C-8与C-14形成含氧三元环,这个降三萜的特征在于三萜骨架8(14→13R)abeo-17,13-friedo-lanostane中侧链的C-24,C-25,C-26,C-27丢失,C-23形成羧基,这是第一次发现这种重排的羊毛脂甾烷型降三萜,这两个化合物都通过单晶衍射(X-ray)确定了其结构和绝对构型;我们还从冷杉(Abies fabri)中发现了一个为十分少见的的9,10裂环的松香烷型二萜(AF-27)和两个具有螺环结构的三萜(AF-1, AF-2),螺环结构的立体构型也通过单晶衍射和核磁方法确定。我们对冷杉属的羊毛脂甾烷型和环阿尔廷烷型三萜化合物的NMR规律进行了初步总结,主要归纳不同类型的羊毛脂甾烷型三萜的区分方法和这两类化合物的常见的结构片段的NMR特征。生物活性方面,在LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7模型中,对分离得到的二萜类化合物进行筛选,发现AF-43抑制NO生成的作用最显著,IC5o为24.2μM。运用MTT法对三萜、四萜和五萜类化合物进行了肿瘤细胞毒的活性筛选,AF-81肿瘤细胞毒活性最强,尤其对细胞株HCT116和ZR-75-30,IC50分别达到1.12μM和1.30μM。
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