在畜禽生产中,家蝇的肆虐对其造成了严重的影响,尽管化学杀虫剂已被广泛用于杀灭家蝇,但其毒副作用表现明显。此外,因家蝇具有极强的繁衍能力,使得养殖场内的家蝇种群数量难以控制,并且化学杀虫剂中含有大量难以降解的有毒成分,长期使用过量的化学杀虫剂,已给养殖场周边环境和人畜的健康带来严重危害。生物杀虫剂作为新型杀虫剂,与化学类的杀虫药剂相比,其具有低毒、低残留、易降解、不宜产生抗药性,且还具有较强选择性等特点,对人畜的健康和生态环境均无不良影响,符合生态学发展的需求。苏云金芽孢杆菌作为一种重要的新型生物杀虫剂,因其来源广、成本低、高效、安全和无污染等特点,在国内外受到了广泛关注,因此具有良好的应用前景,对其作用机制和作用效果深入研究,是该领域研究热点之一。本论文开展苏云金芽孢杆菌以色列亚种（Bacillus thuringiensis subsp israelensis,Bti）的内毒素Cry4BLB基因对家蝇成虫与幼虫杀灭效果的评估。试验对保存的Bti进行复苏与纯化,采用碱裂解法提取菌体基因组;采用PCR技术扩增Cry4BLB基因,构建重组质粒p ET-28a-Cry4BLB,并将其转化至Trans-1感受态细胞中,经PCR鉴定为阳性克隆后,将PCR产物送至安徽通用生物公司进行测序,并作序列分析;最终将重组质粒p ET-28a-Cry4BLB转化至Rosetta感受态细胞中,经PCR鉴定为阳性克隆后,对其进行蛋白的诱导表达,将产物经SDS-PAGE和免疫印迹技术进行鉴定;开展重组蛋白Cry4BLB抗家蝇毒杀试验,评估其对家蝇的毒杀效果。结果表明:成功地扩增出Cry4BLB基因,其大小为1947 bp,经测序后分析并未出现任何突变,其与已知报道的Bt mosquitocidal gene Cry D2（基因编号:M20242.1）的序列同源性最高,高达100%,进化树分析也显示两者在遗传距离上最为接近。将重组质粒导入Rosetta感受态细胞中,经IPTG诱导后,成功表达出目的蛋白,其大小约为77k D目的蛋白;经Western-blot分析,表明在77k D处有目的条带,与预期结果相一致;内毒素Cry4BLB蛋白对家蝇与蝇蛆毒理学分析结果显示:其对家蝇成虫的毒杀有一定的作用,其LD50仅为2.831×10~6cfu/只;而对蝇蛆的杀灭效果较为理想,其LD50高达2.018×10~5cfu/只。所以重组蛋白Cry4BLB对家蝇与蝇蛆有一定的杀灭效果,这为研制新型生物杀虫剂奠定了基础。