益生元对人胃癌细胞株BGC-823细胞的抑制作用及机制的研究

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目的:胃癌是我国乃至全球范围内发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤之一。目前胃癌的治疗多采用手术、放疗、化疗等方法。这些治疗手段容易引起并发症而且成功率不是很高,因而急需研发新的治疗策略。由于胃癌的发生和菌群失调引起的幽门螺旋杆菌的定植、胃黏膜损坏、和胃炎等癌前病变密切相关,能够调整菌群失调的益生元可能对胃肠道癌症的防治有一定的作用。目前益生元对大肠癌的抑制效果已得到广泛验证,而对胃癌的作用鲜见报道。本文通过观察大豆低聚糖、低聚木糖、低聚果糖、低聚甘露糖对人胃癌细胞株BGC-823细胞的体外增殖、细胞周期、凋亡的影响,初步探讨益生元对胃癌细胞的作用效果及相关机制,为明确益生元对胃癌的防治效果,阐明作用的分子机制,开发安全、有效的预防和辅助治疗胃癌的药物奠定基础,并为益生元的有效应用打开新思路。方法:1.用MTT法研究不同浓度大豆低聚糖、低聚木糖、低聚果糖、低聚甘露糖在不同时间对BGC-823细胞的抑制作用。2.用形态学观察和流式细胞仪分析的方法分析不同浓度大豆低聚糖对BGC-823细胞凋亡的诱导作用。3.用流式细胞仪分析不同浓度大豆低聚糖对BGC-823细胞细胞周期的影响。结果:1.大豆低聚糖、低聚木糖、低聚果糖,低聚甘露糖四种益生元对BGC-823细胞均有一定程度的抑制作用(P<0.05),抑制效果基本呈浓度时间依赖关系,但大豆低聚糖、低聚果糖的作用在48h和72h差别不大。在这四种益生元中,大豆低聚糖的抑制效果最强,低聚木糖次之,低聚果糖,低聚甘露糖的抑制效果较弱。作用48h、72h达到对BGC-823细胞半数抑制率的大豆低聚糖的浓度是100mg/ml左右;作用72h时达到对BGC-823细胞半数抑制率的低聚木糖浓度在100-125mg/ml之间;而125mg/ml低聚果糖和低聚甘露糖处理胃癌BGC-823细胞72h,均未达到50%的抑制率。2.大豆低聚糖可以诱导BGC-823细胞的凋亡。形态学观察处理后的BGC-823细胞,可见细胞变形,皱缩,体积变小,细胞间隙增大,细胞核固缩。流式细胞仪分析50mg/ml和100mg/ml大豆低聚糖作用48h和72h BGC-823细胞的凋亡比例,分别为6.76和7.93%。3. 50mg/ml大豆低聚糖作用48h,引起BGC-823细胞出现G1期阻滞,100mg/ml大豆低聚糖作用48h,引起BGC-823细胞出现S期阻滞。结论:1.大豆低聚糖、低聚木糖、低聚果糖、低聚甘露糖对人胃癌细胞株BGC-823细胞有一定程度的抑制作用,其中大豆低聚糖作用最强。2.大豆低聚糖可诱导部分人胃癌细胞株BGC-823细胞凋亡。3.大豆低聚糖对人胃癌细胞株BGC-823细胞的生长抑制作用在低浓度时可能通过G1期阻滞实现,在高浓度时可能通过S期阻滞实现。
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