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随着人工授精技术的推广和优良种畜育种的发展,精液保存技术越来越重要。常温保存中,现有保存液已经可以将猪精液保存12天以上。然而,现有保存液添加成分复杂,保存效果不一致;受精率和产仔率等方面也存在一些问题。大量研究发现,精液保存过程中,ROS的产生和积累是影响精子质量,降低受精能力的关键。在精液保存中,ROS的积累会引起精子线粒体活性改变,同时ROS还会攻击精子质膜的多不饱和脂肪酸,发生脂质过氧化反应,生成大量脂质过氧化物,并引起DNA序列上鸟嘌呤位点发生突变,导致DNA序列发生损伤,DNA双链断裂,+甚至会破坏染色体结构,加剧精子凋亡。因此,在精液保存液中添加抗氧化物质,提高精子抗氧化和清除ROS的能力,是精液保存的一项重要内容。为了研究抗氧化剂水飞蓟素对精液保存效果的影响,本试验在Modena保存液中分别添加12.5μM,25μM,50μM,100μM,200μM的水飞蓟素,检测在常温保存中水飞蓟素对精子活力,质膜完整性,顶体完整性及线粒体活性的影响。结果发现,添加25μM水飞蓟素能够显著提高精子质量,延长精液保存时间。随后,为了探究水飞蓟素的作用机制,我们用200μM的叔丁基过氧化氢诱导精子发生氧化应激,并用25μM水飞蓟素处理氧化应激的精子,检测精子质量,MDA含量,H2O2含量,GSH含量及凋亡水平。结果发现,水飞蓟素能够逆转由叔丁基过氧化氢造成的氧化损伤,提高精子质量。为探究水飞蓟素在精液冷冻过程中的作用,我们在冷冻保护液和解冻液中分别添加12.5μM,25μM,50μM,100μM,200μM,400μM的水飞蓟素。结果发现不论在冷冻液中,还是在解冻液中,添加100μM水飞蓟素都能显著提高精子活力和质膜完整性,降低MDA含量和H2O2含量。最后,我们通过体外受精试验检测了水飞蓟素对精子的受精能力和胚胎发育能力的影响。结果显示,常温保存下添加水飞蓟素能够提高卵裂率和囊胚率。冷冻保存中,解冻液中添加水飞蓟素仅能提高卵裂率,对胚胎发育能力没有影响。通过以上试验结果,我们得出以下结论:（1）在猪精液常温保存中,添加25μM水飞蓟素能够提高精子质量,降低精子ROS水平,提高精子抗氧化能力。（2）添加25μM水飞蓟素能够降低叔丁基过氧化氢造成的精子氧化损伤。（3）冷冻保存中,添加100μM水飞蓟素能够提高精子质量,降低氧化损伤,提高其抗氧化能力。（4）常温保存添加25μM水飞蓟素的精子能够提高体外受精后卵子的卵裂率和囊胚率;解冻液添加100μM水飞蓟素的精子只能提高体外受精后卵子的卵裂率,对囊胚率没有影响。