目的:糖尿病（Diabetic mellitus,DM）是一种慢性代谢性非传染性疾病。在世界范围内已成为流行病。糖尿病患者还将伴有代谢紊乱,例如血糖,血脂和电解质紊乱。糖尿病视网膜病变是糖尿病的微血管并发症,会对视力造成永久性损害,其主要特征是血管增生严重。血管内皮生长因子家族（vascular endothelial growth factor,VEGF）是在微血管疾病发生和发展中发挥重要作用的因子。本实验旨在研究VEGF家族成员VEGF-B对糖尿病视网膜病变的改善作用,并为糖尿病视网膜病变新药物的开发提供理论依据。方法:首先在动物水平腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）致C57/BL6小鼠成Ⅰ型糖尿病模型。注射后分别在4、8和12周,检测小鼠的体重和血糖,并确定小鼠的成模状况。通过尾静脉注射异硫氰酸荧光素（Fluorescein isothiocyanate,FITC）,取出视网膜进行全组织原位染色（Whole Mount）检测视网膜血管渗漏情况。其次,用免疫组化技术检测糖尿病小鼠和正常小鼠视网膜组织内皮细胞中VEGFB的含量。接下来,将正常组小鼠和糖尿病小鼠视网膜组织进行LS/MS检测,筛选出差异蛋白,并结合代谢途径分析（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）和网络途径分析（Ingenuity Pathway,IPA）,Cytoscape,PANTHER等生物信息学软件预测糖尿病小鼠视网膜中VEGF家族以及连接蛋白的表达,并在组织中进行验证。在细胞水平上,我们选用人视网膜内皮细胞（HRECs）,通过敲降和过表达VEGFB,以验证生物信息学结果。最后,将VEGFB蛋白体内注射入玻璃体腔,结合电生理学和光学相干断层扫描（Optical coherence tomography,OCT）方法,并在体外添加VEGFB蛋白来检测细胞渗漏和细胞间连接,以验证VEGFB的治疗效果。结果:通过动物水平验证,发现糖尿病小鼠的视网膜血管从注射STZ造模后的第8周开始出现渗漏,这种情况在第12周仍然存在。免疫组化结果显示,糖尿病组小鼠视网膜内皮细胞中VEGFB表达量低于正常组小鼠。通过质谱检测正常小鼠和糖尿病小鼠视网膜组织,一共鉴定出2546种蛋白,其中具有差异性蛋白236种,通过生物信息学软件分析,糖尿病小鼠中RhoA信号通路被激活,（Cell division cycle 42,CDC42）蛋白下调,并且连接蛋白（zonula occludens-1,ZO-1）和（Vascular Endothelium cadherin,VE-cadherin）的表达也呈下调趋势。并且Western Blot实验也在视网膜组织中验证了生物信息学推测结论。在细胞水平上,敲降VEGFB后,其相关受体及CDC42、ZO-1、VE-cadherin等蛋白表达均下调,并且在过表达后,它们都得以恢复。接下来,在体外高糖模拟糖尿病环境下添加VEGFB蛋白后,细胞间渗漏明显减少,免疫荧光结果发现,高糖条件下连接蛋白ZO-1和VE-cadherin的表达减少,而加入VEGFB蛋白后,连接蛋白的表达明显上调。最后,在糖尿病小鼠玻璃体腔注射VEGFB蛋白后,眼底荧光血管造影（Fundus fluorescein angiography,FFA）检测视网膜渗漏明显减少。OCT层扫和电生理学都显示出视网膜结构和光敏功能的改善。结论:我们已经成功建立了 NPDR小鼠模型,并结合蛋白质组学分析表明VEGFB在从动物水平调节DR的过程中起着重要作用。在体外进一步验证,发现VEGFB可能通过下调Rho信号通路中CDC42从而下调连接蛋白ZO-1和VE-cadherin的表达最终使微血管通透性增加。这项研究证明VEGFB可以改善NPDR血管渗漏等症状,并证实其潜在机制。为NPDR的治疗提供理论依据。