CDK12在急性白血病患者中的表达及临床意义

来源 :赣南医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lullm
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目的:本研究主要通过收集急性白血病(Acute leukemia,AL)患者的骨髓标本及临床诊疗相关数据,运用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-PCR)技术检测骨髓中单个核细胞里的CDK12(cyclin-dependent kinases 12,CDK12)的相对表达量,探究CDK12的表达水平与AL的发生、演变和预后之间的关系,为临床AL的诊疗与预后评估提供新的分子标记物。方法:1.研究对象:实验组为赣南医学院第一附属医院血液内科在2021年4月至2021年12月收治入院的急性白血病患者122例,包括急性非淋巴细胞白血病(Acute non-lymphocytic leukemia,ANLL)79例和急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)43例,其中ANLL组中包括初治期患者35例,缓解期患者24例,复发难治期患者20例;而ALL组中包括初治期患者11例,缓解期患者19例,复发难治期患者13例。对照组收集的是同期在我院住院的非恶性血液病患者30例。收集上述研究对象的骨髓血标本及有关的临床资料。2.研究方法:使用红细胞裂解液进行分离骨髓当中的单个核细胞,骨髓中的单个核细胞总RNA通过使用Trizo L法获取,根据美国BIO-RAD公司i Script c DNA Synthesis Kit试剂盒的说明书进行实验操作,通过逆转录方法完成c DNA的制备。运用RT-PCR技术检测骨髓单个核细胞中CDK12的表达水平。3.统计学方法:通过SPSS18.0统计软件对实验有关数据进行分析。计数资料通过率进行表示,使用卡方检验;计量资料以范围、中位数及四分位数进行描述,两组间的数据进行比较则使用Mann-Whitney U秩和检验,多组间的数据进行比较则使用Kruskal-Wallis H非参数检验。通过公式2-△△Ct进行计算CDK12的相对表达水平,△Ct=Ct目标基因-Ct内参基因,△△Ct=△Ct实验组-△Ct对照组中值。经过统计验证,2-△△Ct的数据不服从正态分布且方差不齐,因而通过中位数+四分位数进行表示,CDK12的相对表达量和临床数据之间采用Spearman秩相关性分析。P<0.05表示具有统计学意义。结果:1.ANLL与ALL这两组患者的CDK12的相对表达量都显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001,P<0.001);ANLL与ALL进行比对,CDK12的相对表达量存在差异,但差异不具有统计学意义(P=0.522)。2.初治组、复发难治组及缓解组CDK12的表达水平相对于对照组均上调。初治组及复发难治组CDK12的相对表达量都明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001,0.001);与对照组相比,缓解组CDK12的相对表达量也升高,但差异并没有统计学意义(P=0.0545)。3.CDK12在ANLL的各类亚型中的相对表达量存在一定的差异。在M0、M2、M3、M4、M5各亚型中,CDK12的相对表达量分别为8.259(6.111~10.407)、4.854(3.857~7.731)、6.169(3.818~8.119)、3.804(6.616~7.304)、4.854(4.027~8.083),ANLL各类亚型之间的表达量差异没有统计学意义(P=0.6796)。4.根据初治组首次化疗效果进行分组比较,CDK12在完全缓解组(complete remission,CR)和未缓解组(non-remission,NR)AL中的表达量分别为:1.375(0.576~7.522),6.756(2.597~7.480),NR组患者CDK12的表达量显著高于CR组患者,差异具有统计学意义(P<0.001)。5.将初治组中ANLL患者以年龄(60岁为界)、性别、危险度(中低危与高危)进行分组,发现CDK12的相对表达量与患者的年龄、性别及危险度之间无明显相关。6.初治组中CDK12的相对表达量与骨髓原始细胞占比、WBC计数及LDH水平呈正相关(P=0.034,0.012,0.002),与PLT、RBC、HGB、WT1、CRP等均没有发现存在相关性(P>0.05)。结论:1.CDK12在AL中普遍存在高表达现象,并在不同治疗时期存在差异性表达,以初治组及复发难治组显著高表达,有助于对AL进行预后评估。2.CDK12在ANLL的各类亚型中的表达差异没有统计学意义。3.CDK12在初次化疗后NR组表达量显著高于CR组。4.CDK12与骨髓原始细胞占比、WBC计数及LDH水平呈正相关,在一定程度上可反映白血病的肿瘤负荷程度。
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