大鼠围产期缺氧缺血性脑损伤后MMP-2、MMP-9 mRNA的表达及意义

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【目的】观察MMP—2mRNA、MMP—9mRNA在大鼠围产期缺氧缺血性脑损伤后的表达,探索两者与缺氧缺血性脑损伤的关系。 【方法】(一)应用“延迟剖宫产术”制备Sprague-Dawley大鼠“宫内窘迫”模型,模型胎鼠分别作缺氧缺血10分钟及20分钟处理,所有的胎鼠分为四组:缺氧缺血10分钟组、缺氧缺血20分钟组、自身对照组及空白对照组,并制备胎鼠脑腹侧视交叉水平、漏斗水平8μm冠状冰冻切片,采用原位杂交方法观察在大鼠围产期脑缺氧缺血后0小时、8小时、1天、2天、3天各时间点MMP-2mRNA、MMP-9mRNA在脑组织内的表达水平;(二)体外培养围产期胎鼠脑皮层神经细胞,培养7天后以液体石蜡覆盖培养液表面形成缺氧培养环境72小时,观察MMP-2mRNA、MMP-9mRNA在缺氧组及对照组的表达变化。 【结果】(一)MMP-2mRNA、MMP-9mRNA原位杂交结果:(1)空白对照组:脑缺氧缺血后0小时至72小时未见MMP-9mRNA阳性表达;MMP-2mRNA在脑缺氧缺血后各时间点海马区均可见持续微弱的阳性表达。(2)自身对照组:脑缺氧缺血后8小时MMP-9mRNA阳性表达出现在海马、背侧丘脑,但信号较弱;MMP-2mRNA表达无变化。(3)缺氧缺血10分钟、20分钟组:缺氧缺血后24小时脑内MMP9 mRNA阳性表达至最高峰,缺氧缺血10分钟组大量表达在端脑背外侧面皮质内,缺氧缺血20分钟组在端脑内侧面后份大脑纵裂旁周围皮质及背外侧面皮质内呈强阳性表达,少数纤维呈亦阳性染色。脑缺氧缺血后48小时MMP-9mRNA阳性表达稍减弱,缺氧缺血10分钟组只见于端脑背外 大鼠围产期缺氧缺血性脑损伤后MMP一二、MMP—glnRNA的表达及意义侧面局部皮质;缺氧缺血20分钟组可见端脑背外侧面皮质内、海马区呈强阳性表达,在海马区尤以CA3区明显,尾壳核也可见少数阳性染色细胞。脑缺氧缺血后72小时MMP刁 仍大量表达在海马区及端脑背外侧面皮质,在皮质可见阳性染色大量定位于纤维组织。缺氧缺血后MMP亿 阳性表达增高不显著,缺氧缺血10分钟组主要在CA3区明显,缺氧缺血20分钟组部分标本在海马m、2、3、4区可见 MMP-ZlllltnA阳性表达。(二)缺氧培养 72’J’时后体外培养皮层神经细胞缺氧组和对照组均未见MMP—2、一glnRNA阳性表达。 【结论】MMP—glnRNA在大鼠围产期缺氧缺血性脑损伤后呈时间依赖性表达,可能是围产期缺氧缺血脑损伤机制重要因素之一;缺氧条件下体外培养围产期大鼠脑皮层神经绍胞未见MMP—2、MMP—glnRNA诱导表达,报测围产期脑缺氧缺血不诱导早期神经元合成分泌MMP—2、MMP—9。
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