论文部分内容阅读
目的：从土荆芥中提取出总黄酮类化合物，观察其对体外人类乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响；并初步探讨其抑制MCF-7细胞增殖的可能机制，为土荆芥作为抗癌药物的开发和利用提供科学依据。方法：超声波法提取土荆芥总黄酮类化合物，并采用了高效液相色谱串联质谱法技术对其中槲皮素和山柰酚含量进行了测定；采用了MTT法检测不同浓度的土荆芥总黄酮类化合物、槲皮素、山柰酚在不同培养时长下（12h、24h及48h）对体外培养的MCF-7细胞生长的影响； Hoechst染色、DNA凝胶电泳检测土荆芥总黄酮类化合物对MCF-7细胞凋亡的影响；流式细胞术的细胞周期分析检测土荆芥总黄酮类化合物对MCF-7细胞细胞周期的影响；检测处理后MCF-7细胞中MDA的含量、SOD酶及CAT酶的活力来探讨土荆芥总黄酮类化合物对MCF-7细胞的氧化损伤作用。结果：超声波法提取土荆芥总黄酮类化合物得率为10.19%，提取物中槲皮素和山柰酚含量分别为0.542~0.501PPM和1.192~1.187PPM；不同浓度的土荆芥总黄酮类化合物在处理时间为12h、24h及48h，对MCF-7细胞活性均有抑制作用，且抑制作用具有剂量依赖性，随着培养时间的延长其抑制作用会随之增强；然而槲皮素在对应浓度下对MCF-7细胞活性未观察到显著抑制作用，山柰酚则只在12h处理组下对MCF-7细胞活性有一定抑制作用；观察到Hoechest染色土荆芥总黄酮类化合物少量诱导MCF-7细胞出现凋亡小体，DNA凝胶电泳中未观察到明显的梯形条带；流式细胞术检测显示土荆芥总黄酮类化合物可使MCF-7细胞阻断在G1期；土荆芥总黄酮类化合物对MCF-7细胞造成氧化损伤，使细胞内的MDA含量、SOD酶、CAT酶活力升高，并呈一定的剂量依赖性关系。结论：土荆芥总黄酮类化合物对MCF-7细胞增殖有显著的抑制作用，其抑制作用可能主要通过氧化损伤所致的细胞毒性实现。为土荆芥作为抗癌药物开发奠定了一定的基础。