【摘 要】
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奶牛胎衣不下(RFM)对奶牛的生产性能和繁殖能力有严重危害,是临床上常见产科疾病之一。引起该病的病因十分复杂,疾病发生的分子基础尚不明确,目前仍没有切实有效的方法预测该病的
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奶牛胎衣不下(RFM)对奶牛的生产性能和繁殖能力有严重危害,是临床上常见产科疾病之一。引起该病的病因十分复杂,疾病发生的分子基础尚不明确,目前仍没有切实有效的方法预测该病的发生。因此,对胎衣不下病因的研究对于管控该病至关重要。产后胎衣正常分离和排出的过程复杂,涉及到母体和胎儿体内多种激素及其受体水平的改变,任何一个环节出现异常都有可能导致RFM的发生。因此,对奶牛血液中的激素和相关因子进行检测,分析与胎衣不下发生的相关性,有可能发现预测该病发生的关键因素。本试验对分娩后奶牛血浆中激素的含量进行测定,并对胎儿胎盘中激素受体的表达量进行了检测,分析奶牛胎衣不下与激素含量及其受体表达的相关性,探讨奶牛胎衣不下的发生机制。选取RFM组和胎衣正常脱落(NRFM)组奶牛各10头,试验奶牛分娩后立即进行尾静脉采血。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、雌激素(E2)、催产素(OT)和前列腺素F2α(PGF2α)的含量。采集RFM组和NRFM组奶牛胎儿胎盘组织,运用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测胎盘组织中血管紧张素1型和2型受体(AT1-R和AT2-R)、雌激素受体α(ERα)、催产素受体(OTR)、前列腺素F2α受体(FP)基因mRNA相对表达水平的差异。为进一步在蛋白水平对AT1-R和ERα基因表达量进行分析,通过蛋白免疫印迹技术(Western blotting)对胎盘组织中AT1-R和ERα蛋白表达水平进行检测。结果表明,RFM组血浆中AngⅡ和OT的含量极显著低于NRFM组(P<0.01),E2的含量显著低于NRFM组(P<0.05),而PGF2α的含量差异不显著(P>0.05)。AT1-R、AT2-R、ERα、OTR和FP基因mRNA在胎儿胎盘均有表达,其中RFM组AT1-R、AT2-R和ERαmRNA表达量极显著低于NRFM组(P<0.01),OTR和FP基因mRNA表达量差异不显著(P>0.05)。RFM组胎儿胎盘中AT1-R和ERα蛋白表达极显著低于NRFM组(P<0.01),这与mRNA的表达水平上基本一致。由此可见,奶牛血浆中激素含量及胎儿胎盘中激素受体的表达量与RFM的发生密切相关,因此可以通过检测血浆中AngⅡ、E2和OT的含量变化来预测RFM的发生。从NRFM组胎儿胎盘中AT1-R、AT2-R和ERα基因表达的高度表达可以推测,AngⅡ和E2通过与其特异性受体结合,发挥节律性地收缩血管、增加MMPs的表达和活性、诱导细胞质Ca2+浓度升高等作用,有利于胎盘排出。但OTR和FP的表达及作用机理对奶牛RFM的影响还有待于进一步研究。
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