论文部分内容阅读
Forkhead O transcription factors(FOXOs)是在细胞面对外界刺激或内部变化时其自身命运决定过程一个重要的调控分子。FOXO3a是FOXO转录因子家族的一个重要成员,在细胞的生长增殖和细胞凋亡的调控中发挥重要作用；FOXO3a的活化能够抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。然而,在某些刺激情况下,FOXO3a的活化能够帮助细胞清除这些刺激给细胞带来的损伤,起到保护细胞免于损伤和凋亡的作用。FOXO3a和另外一个重要的转录因子p53之间存在“Crosstalk”。激活p53能够上调FOXO3a的磷酸化水平,从而抑制FOXO3a的转录活性。然而,p53对FOXO3a调控的机制以及其生物学意义还不清楚。在本研究中,我们发现在doxorubicin引起的DNA损伤过程中,p53能够引起FOXO3a蛋白表达水平的下调,而对其mRNA表达水平没有显著影响。p53对FOXO3a的抑制作用依赖其自身的转录活性。根据以往的报道,MDM2能够作为FOXO3a的泛素化修饰连接酶E3介导FOXO3a的蛋白降解,然而,我们的研究表明MDM2并不参与p53对FOXO3a的蛋白抑制过程。我们发现,在doxorubicin引起的DNA损伤初期,FOXO3a从细胞核外转移到细胞核内,激活其下游基因的转录:随着DNA损伤的积累,高度激活的p53最终导致细胞内FOXO3a蛋白的表达下降。运用基因沉默技术抑制内源FOXO3a的表达水平,能够显著增强DNA损伤引起的细胞凋亡作用。我们推测,在DNA损伤过程中,活化的FOXO3a作为抗凋亡因子,能够保护细胞免受进一步的损伤；然而,在损伤积累到细胞无力修复的情况下,p53对FOXO3a的抑制作用将有助于细胞更快的进入细胞凋亡程序。我们的研究结果提示,p53对FOXO3a的调控存在一种新的机制,并就DNA损伤过程中p53对FOXO3a的调控的生物学意义提出了一种新的视角。