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研究背景:脑卒中引发的炎症反应直接影响缺血性卒中后脑损伤修复和预后,小胶质细胞活化状态及功能直接调控缺血性卒中后炎症反应,并影响卒中转归。缺血性卒中后,小胶质细胞内多种长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)差异表达,这些lncRNA可能参与调控小胶质细胞功能,但其具体作用机制尚未阐明。LncRNA-1810034E14Rik在小胶质细胞中广泛分布,但对其功能研究尚缺乏。在本论文中,我们探讨了缺血性卒中后lncRNA-1810034E14Rik的变化趋势,及lncRNA-1810034E14Rik能否调控缺血性卒中后小胶质细胞功能。此外,我们还进一步探索了 lncRNA-1810034E14Rik调控小胶质细胞功能的分子机制。研究方法:体外实验中,我们从C57BL/6乳鼠皮层提取原代小胶质细胞,糖氧剥夺(Oxygen glucose deprivation,OGD)后提取RNA进行lncRNA差异表达芯片分析,从中筛选出差异表达的lncRNA,并进行生物信息学分析,挑选出目标lncRNA-1810034E4Rik。我们包装lncRNA-1810034e14Rik过表达慢病毒,OGD 24小时前转染小胶质细胞,用ELISA检测其炎症因子分泌,免疫荧光观察小胶质细胞激活状态,并用划痕实验检测小胶质细胞迁移能力,用荧光微球检测其吞噬功能。同时我们将小胶质细胞与神经元体外条件共培,CCK-8法和LDH释放法检测神经元存活状态。在体内实验部分,我们对C57BL/6鼠行一侧大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,于再灌注不同时间点检测梗死侧皮层lncRNA-1810034E4Rik表达变化。我们对C57BL/6鼠皮层立体定位注射lncRNA-1810034E14Rik过表达慢病毒,2周后行MCAO并于1天后检测脑梗死体积和神经行为功能。我们利用免疫荧光检测缺血半暗带小胶质细胞激活状态,ELISA检测梗死侧皮层炎症因子浸润情况,最后用western blot对体内外NF-κB信号通路变化情况进行检测。结果:1)LncRNA芯片分析结果显示:OGD后小胶质细胞较对照组lncRNA差异表达,其中lncRNA-1810034E14Rik表达显著下调(0.2倍vs对照)。2)与Control组相比,过表达lncRNA-1810034E14Rik显著减少小胶质细胞激活,降低炎症因子分泌。3)过表达lncRNA-1810034E14Rik对小胶质细胞迁移和吞噬能力影响不明显。4)过表达lncRNA-1810034E14Rik可以减轻OGD后小胶质细胞对神经元的毒性作用。5)与Sham组相比,皮层过表达lncRNA-1810034E14Rik可以改善MCAO小鼠运动功能损伤,减轻脑组织水肿,减少小鼠脑梗死体积;梗死侧炎症因子释放减少,小胶质细胞激活程度降低。6)MCAO后小鼠皮层和OGD后小胶质细胞内NF-κB通路激活,过表达lncRNA-1810034E14Rik显著抑制了 p65磷酸化,减少其核内转移。结论:1)LncRNA-1810034E14Rik可以降低缺血性卒中后梗死体积,改善神经功能损伤;lncRNA-1810034E14Rik明显减少缺血性卒中后小胶质细胞活化,抑制神经炎症反应。2)lncRNA-1810034E14Rik可以通过抑制NF-κB信号通路减少小胶质细胞活化。