5-ALA光动力疗法对卵巢癌裸鼠移植瘤细胞的杀伤作用研究

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目的:探究5-ALA光动力疗法(PDT)对卵巢癌裸鼠移植瘤细胞的杀伤作用。方法:建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分为模型组、5-ALA组、激光照射组、5-ALA-PDT组,每组10只。5-ALA组、5-ALA-PDT组分别予瘤内注射40 mg/kg的5-ALA无菌生理盐水溶液,模型组、激光照射组给予瘤内注射等量生理盐水。4 h避光后,激光照射组、5-ALA-PDT组用630 nm激光治疗仪局部照射瘤体,每次照射20分钟。每隔2 d接受1次,总共5次。治疗完成后测量瘤体体积,脱臼法处死四组小鼠进行解剖,取出肿瘤进行下一步实验。(1)测量移植瘤大小,并绘制肿瘤生长曲线图;(2)计算抑瘤率并绘制柱状图比较;(3)HE染色的组织切片;(4)TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡情况;(5)应用q RT-PCR(实时荧光定量PCR)技术,对cleaved Caspase-3、Bcl-2基因与Bax基因的m RNA进行测定;(6)利用Western blot(免疫印迹法)技术检测cleaved Caspase-3、Bcl-2与Bax的蛋白表达。结果:相比于模型组和5-ALA组,激光照射组与5-ALA-PDT组干预14 d后的瘤体体积均更低,且5-ALA-PDT组的瘤体体积在四组中最低(P<0.001)。激光照射组和5-ALA-PDT组治疗7 d、14 d后的抑瘤率均高于模型组和5-ALA组(P<0.001),同时5-ALA-PDT组高于激光照射组(P<0.05)。激光照射组和5-ALA-PDT组的组织cleaved Caspase-3与Bax的m RNA表达与蛋白表达均高于模型组和5-ALA组(P<0.001),同时5-ALA-PDT组高于激光照射组(P<0.001);激光照射组和5-ALA-PDT组的组织Bcl-2 m RNA表达与蛋白表达均低于模型组和5-ALA组(P<0.001),同时5-ALA-PDT组低于激光照射组(P<0.001)。结论:5-ALA-PDT治疗卵巢癌可通过上调cleaved Caspase-3、Bax表达、抑制Bcl-2表达来增强对诱导肿瘤细胞凋亡,从而增强其杀伤作用。
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