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乳腺肿瘤是女性最常见的疾病之一，由于冷冻乳腺组织镜下形态千变万化，给术中诊断带来了巨大的挑战，因此如何提高术中病理诊断的准确率对临床治疗具有重大的意义。本文将探讨一种快速Feulgen染色方法并分析术中组织印片细胞DNA倍体在乳腺快速冰冻诊断中的价值，同时探讨DNA倍体与Ki-67的表达及临床病理特征的关系，为乳腺肿物的诊断、术中制定手术方案及评价预后提供一定的理论依据。首先用成年雄性健康SD大鼠的肝脏组织标准印片进行快速Feulgen染色，通过设定不同的实验温度和水解时间分析得出适合术中快速Feulgen染色的最佳染色时间及温度，为术中DNA倍体分析提供准确和标准的实验方法。我们收集2012年2月-2014年2月间北京市空军总医院病理科术中送检乳腺标本230例，230例乳腺标本均进行冰冻切片、组织印片快速Feulgen染色并进行DNA倍体分析。将高年资病理医师分成两组：一组由2名医师采用双盲法对冰冻切片进行术中诊断；另一组先由技师将组织印片进行DNA扫描，然后由另两名医师结合术中DNA倍体扫描结果对冰冻切片进行双盲阅片，做出联合诊断，以上术中诊断结果均与术后石蜡切片诊断结果对比分析。术后检测乳腺组织Ki-67的表达情况，同时收集临床资料及术后组织病理资料。我们观察快速Feulgen染色中不同温度下IOD值可以看出，在60℃和染色时间5min时，DNA含量（IOD值）最大，而且染色效果非常满意，结构清晰、细胞核染色深、背景着色淡。所以我们用以上染色条件作为本实验组的Feulgen染色方法。术中送检的101例良性乳腺标本印片后99例经快速Feulgen染色未扫描到>5C的异倍体细胞，扫描结果为阴性，2例扫描到>5C的异倍体细胞，结果为阳性；129例恶性乳腺标本印片后114例经快速Feulgen染色扫描到数量不等的>5C异倍体细胞，扫描结果为阳性，15例未扫描到>5C的异倍体细胞，结果为阴性；快速Feulgen染色法的DI均值和>5C细胞百分数均值与常规Feulgen染色法无明显差异（P>0.05）。230例术中乳腺标本冰冻切片单独诊断准确率为98.69%，延迟诊断率6.96%。术中冰冻切片结合DNA倍体分析联合诊断准确率为99.57%，延迟诊断率1.74%。冰冻切片与联合诊断的准确率无明显差异（P>0.05），而延迟诊断率有统计学意义（P<0.05）。DNA倍体分析诊断的敏感性、阴性预测值不如冰冻切片诊断（P<0.05）；DNA倍体分析诊断的敏感性、阴性预测值不及冰冻切片联合DNA倍体分析的诊断（P<0.05）；二者联合诊断的各项诊断指标均比单纯冰冻切片诊断高，但均没有统计学意义（P>0.05）。组织学分组中只有纤维腺瘤和导管内乳头状瘤的DI均值无统计学意义，其它各组间>5C细胞百分数均值和DI均值比较都有统计学意义（P<0.05）。随着Ki-67分级的增加，DNA含量也增加，且DNA倍体含量的增加具有统计学意义（P<0.05）；根据术后组织病理资料分析，DNA含量与组织学分级和淋巴结转移显著相关（P<0.05），但DNA含量与患者肿物大小、年龄无关（P>0.05）。快速Feulgen染色方法快速，准确，稳定，易于自动化操作，具有良好的染色效果，比常规Feulgen染色法大大缩短了染色时间，可应用于术中冰冻AICM诊断DNA含量与倍体的测量和分析。对于大多数乳腺肿物，AICM-DNA和冰冻切片诊断一致，AICM-DNA可作为术中冰冻切片的一种良好辅助检测方法。冰冻切片联合组织印片细胞DNA倍体能提高术中乳腺冰冻诊断的准确率，测定结果客观，能提供有价值的诊断依据，应用前景广阔。DNA含量与乳腺癌患者的年龄，肿瘤大小无关；DNA含量与淋巴结转移，组织病理分级，Ki-67值相关。组织学分级和Ki-67值越高DNA含量也越高，提示肿瘤的恶性度大，预后差。