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目的:观察金银花复方对类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）活动期湿热瘀阻证的临床疗效和安全性;探讨复方君药金银花有效成分木犀草苷（Galuteolin,Galu）对于TNF-α诱导的类风湿关节炎成纤维滑膜细胞（fibroblast-like synoviocyte,FLS）的影响,从分子角度分析金银花复方缓解活动期RA的部分潜在作用机制;更好地继承和发掘名老中医经验,为进一步探讨金银花复方的作用机制打下基础。方法:1.临床试验部分:收集60例活动期类风湿关节炎湿热瘀阻证患者,通过临床随机对照试验,采集患者基本资料、四诊信息、实验室检查等资料,观察金银花复方治疗活动期类风湿关节炎湿热瘀阻证的临床疗效,主要观察了中医证候积分、疾病活动度评分（DAS28评分）、类风湿因子（RF）、血沉（ESR）等指标,依据中医证候疗效标准及ACR20/50/70标准,评价疾病治疗的总体疗效。2.基础实验部分:用TNF-α刺激经不同浓度Galu预处理过的RA-FLS,观察不同浓度Galu对TNF-α刺激下的RA-FLS细胞增殖的影响,选取最佳Galu浓度进行后续实验;观察Galu对RA-FLS增殖、凋亡、炎症方面的影响,探索Galu发挥作用的可能途径。在研究中,用CCK-8比色法检测细胞增殖情况;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测IKKβ、p-p65、p65、p-IκB、I-κB、Cleaved-caspase-3,Caspase-3,Bcl-2和Bax的表达;qRT-PCR检测HO-1;ELISA法检测促炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8和MMP1的含量。结果:1.临床部分:本临床试验共有57例患者完成了 12周的观察,其中女性患者41例,男性患者16例。对于两组治疗前的性别、年龄、病程、治疗前中医证候积分、治疗前DAS28的基线进行统计学比较均无统计学差异（P>0.05）,具有可比性。1.1中医证候疗效方面,治疗组临床缓解的有10例,显效有15例,有效2例,无效2例;对照组临床缓解的有4例,显效有9例,有效9例,无效6例。因显效级别为等级变量,故采用秩和检验对两组疗效进行差异性分析可知,治疗组平均秩次为34.98,对照组为22.80,秩次越高表明疗效越好,Z=-2.918,P=0.004<0.05,即两组疗效存在差异,治疗组疗效更好。1.2 ACR20/50/70疗效方面,治疗组达到ACR20标准的患者有16例,达到ACR50标准的有7例,达到ACR70标准的有1例;对照组达到ACR20标准的患者有12例,达到ACR50标准的有9例,无达到ACR70标准的患者。因ACR疗效为等级变量,故采用秩和检验对两组ACR疗效进行差异性分析可知,治疗组平均秩次为29.41,对照组为28.57,Z=-0.208,P=0.835>0.05,即两组ACR疗效不存在差异。1.3中医证候积分方面,经12周的治疗后,治疗组及对照组均能明显降低患者的中医证候积分,且治疗组的疗效优于对照组。随后进一步比较了各症状的单项评分,发现治疗组及对照组均能明显降低患者的关节疼痛、关节肿胀、关节压痛及晨僵评分,治疗组还能显著降低屈伸不利、关节发热、疼痛夜甚及舌黯证候评分。在关节发热、疼痛夜甚、舌黯方面治疗组的疗效明显优于对照组,而在关节疼痛、关节肿胀、关节压痛、屈伸不利及晨僵五项积分中,两组疗效的差异尚未达到统计学意义。1.4治疗12周后,治疗组及对照组均能明显降低患者的DAS28评分,但两组之间比较无统计学差异,即在降低DAS28评分方面两组疗效相当。1.5在ESR/RF方面,治疗组及对照组均能明显降低患者的ESR、RF,在降低ESR水平方面治疗组的疗效优于对照组,在改善RF方面两组无统计学差异。2.实验部分2.1 Galu以剂量依赖性方式显著抑制RA-FLS细胞的增殖。2.2 Galu可上调HO-1、Cleaved-caspase-3和Bax的表达水平,降低Bcl-2的表达水平,显著促进RA-FLS细胞凋亡率;而且,HO-1可能参与了 Galu的促凋亡过程,并且是Galu诱导RA-FLS细胞凋亡中的下游靶标。2.3 Galu还能显著降低RA-FLS细胞中促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8和MMP1的水平,对TNF-α诱导的RA-FLS细胞炎症具有良好的抑制作用;并且,HO-1可能是Galu在抑制RA-FLS细胞炎症中的下游靶标。2.4 Galu可显著抑制IKKβ、p-p65和p-IκB的水平,而沉默HO-1可上调上述蛋白在RA-FLS中的表达。结果表明,Galu可能通过激活HO-1抑制IKKβ/NF-κB途径,以抑制TNF-α诱导的RA-FLS细胞的增殖和炎症。结论:1.联合运用金银花复方可以更好地缓解活动期RA湿热瘀阻证患者的临床症状,降低相关炎症指标水平,提高中医证候缓解程度。2.金银花复方君药单体Galu可能通过激活HO-1的表达,抑制IKKβ/NF-κB信号通路,从而抑制RA中滑膜细胞增殖和炎症反应,促进滑膜细胞的凋亡。