脾胃虚损型重症肌无力蛋白组学早期探索性研究

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目的:通过对脾胃虚损型重症肌无力患者及正常人骨骼肌标本的对比,寻找脾胃虚损型重症肌无力患者骨骼肌与正常人骨骼肌之间差异性蛋白。方法:挑选广州中医药大学第一附属医院住院部内符合纳入标准的重症肌无力患者6例和正常人对照组3例,制备标本,提取蛋白,用24cm, pH4-7的胶条行第一项等电聚焦,12.5%SDS-PAGE凝胶行双向电泳,用Image Master2D platinum5.0软件分析双向电泳图谱,寻找差异性蛋白,用AutoflexTM speed MALDI-TOF(TOF)质谱仪进行肽段的图谱的数据分析,登陆http://www.uniprot.org/,检索所得蛋白的信息,鉴定蛋白质。结果:从脾胃虚损型重症肌无力骨骼肌组织中共筛选出31个存在差异的蛋白点,其中6个为男性与女性表达差异点,选取有明显差异的21个点行质谱分析,共有15个点得到鉴定,其中有2个点发生重复,共找到与之匹配的蛋白质13种。其中Myosin-2、 Myosin-1、Fibrinogen gamma chain、Cytochrome b-cl complex subunit1, mitochondria、fibrinogen beta chain isoform2Preproprotei、Uncha-racterized protein、thioredoxin-dependent peroxide reductase, mitochondrial isoform b在重症肌无力患者中表达上调,Isoform2of [Protein ADP-ribosylarginine] hydrolase-like protein1、 Inositol1,4,5-trisphosphate receptor type1、 Actin, alpha skeletal muscle、ATP synthase subunit beta, mitochondrial在重症肌无力患者中表达下调,Mvosin-7在女性患者中表达上调。结论:用双向电泳-质谱技术成功鉴定脾胃虚损型重症肌无力骨骼肌中存在表达差异性蛋白质,奠定了重症肌无力蛋白组学的发展的基础,为重症肌无力的发病机制、疗效评价、靶向治疗等指引出一条新的途径。经蛋白质功能检测后,经鉴定蛋白涉及到细胞的框架结构,细胞的运动、表达、凋亡等,其功能包括掌管肌肉的收缩、凝血功能障碍等,但这些蛋白与重症肌无力发病是否存在特异性的联系,仍有待进一步证明。
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