表皮生长因子受体家族(EGFRs)是酪氨酸激酶受体家族(RTKs)的一员,包括EGFR/HER2/HER3/HER4四个成员,其中EGFR和HER4具备完整的配体结合域以及激酶结构域,而HER2缺乏结合配体的能力,HER3的激酶域没有激酶活性。EGFRs异常表达会导致下游信号通路的异常激活,从而引起癌症的发生,目前在肺癌、乳腺癌等多种癌症的治疗中,EGFR以及HER2受体已成为重要的药物靶点。靶向EGFR、HER2受体的抗癌药物主要有小分子激酶抑制剂以及大分子抗体药物,两者分别作用于受体的激酶结构域和胞外域,抑制受体磷酸化。且两者因作用位点不同,可联合使用解决耐药性问题。但是信号从胞外到胞内激酶结构域的传导机制尚不清楚,有研究表明EGFRs的激活需要激酶结构域形成非对称二聚体,因而我们通过构建Split YFP互补系统,研究抗癌药物对EGFR/HER2激酶二聚体形成的影响。在该实验中,我们使用YFP作为双分子荧光互补技术中的荧光蛋白,在EGFR以及HER2的C端,分别添加上YFP-N以及YFP-C两个蛋白片段,通过检测YFP信号间接反映EGFR/HER2激酶二聚体的情况。我们发现小分子激酶抑制剂Gefitinib、Lapatinib以及大分子抗体药物Herceptin都可以促进二聚体的形成,同时Gefitinib、Lapatinib分别与Herceptin联合使用EGFR/HER2的二聚体都表现出了增多的趋势。同时通过验证靶向EGFR的荧光探针C3P3对EGFR抑制作用以及可筛选作用,我们发现C3P3探针在抑制EGFR磷酸化水平的同时,对突变型EGFR具有更强的结合力,C3P3的应用为肿瘤特异性标记提供了思路。