YZG-331是以中药天麻中有镇静催眠活性的成分为先导物衍化而来的一个新化合物。其镇静效果显著,结构新颖,拟申报化学药品第1.1类新药。考察药物对于中枢神经系统中不同脑组织部位各种生化成分的影响,特别是神经递质的影响,是研究镇静催眠药物药理学机制的常用方法之一。因此,本研究从神经化学角度探讨YZG-331镇静催眠的机制。前期实验表明,YZG-331可以剂量依赖性地抑制动物的自主活动,且可以剂量依赖性地延长小鼠NREM睡眠时间,缩短入睡潜伏期,镇静催眠效果显著。本实验结果显示在合并阈上剂量戊巴比妥钠实验中,YZG-331(5、10、20 mg/kg,i.g.)对小鼠睡眠时间延长率分别为23.7%(p=0.09),46.2%(p<0.05),82.8%(p＜0.01);同时可以显著的缩短小鼠入睡潜伏期。该结果与实验室前期结果一致,证明YZG-331药效显著且稳定。在此基础上开展该作用机制的研究。用HPLC法检测YZG-331对多个核团微透析液和组织匀浆中神经递质含量的影响。采用脑内微透析法取样后检测结果显示,给予YZG-331(40mg/kg,i.g.)后,小鼠DRN/CPu/GPe/OFC四个核团微透析液中GABA水平在较短时间内显著升高(DRN:104.1%,p<0.05;CPu:70.8%,p<0.01;GPe:59.5%,p<0.01;OFC:20.8%,p<0.01);Glu 水平仅在 CPu 核团中显著升高(19.8%,p<0.01);NE 含量在所检测核团中均无显著变化;DA含量在在给药后60-90 min的CPu微透析液中显著下降(31.6%,p<0.01),在DRN核团中无显著变化,在GPe和OFC透析液中DA含量低于检测限。YZG-331(40 mg/kg,i.g.)对GPe组织匀浆中GABA和Glu含量无显著影响;使CPu组织匀浆中DA含量下降但并无显著性,对Hypo和PFC组织匀浆中NE浓度亦无明显改变。脑中NO含量升高可诱导动物入睡。实验结果显示,YZG-331(40mg/kg,i.g.)可显著升高小鼠脑中NO的含量(26.9%,p<0.01);使cNOS的活力升高34.6%(p=0.064,n=3),但TNOS和iNOS的活性没有明显改变;Western blot检测结果显示YZG-331(40 mg/kg,i.g.)可使Hypo和DRN核团中p-CaMKⅡ表达显著降低。综上所述,本研究结果发现YZG-331可以通过显著升高CPu、GPe、OFC和DRN四个核团微透析液中GABA含量,增强其与GABAa受体结合后介导的抑制性作用,导致脑内神经元的活性减弱,这可能是YZG-331发挥镇静催眠作用的机制之一。YZG-331对小鼠各核团微透析液和组织匀浆中NE含量均无显著影响,提示YZG-331镇静催眠的机制可能与NE无关。YZG-331(40 mg/kg,i.g.)还通过抑制小鼠Hypo和DRN核团CaMK Ⅱ的磷酸化,使nNOS活性升高,导致脑内NO含量升高。文献报道NO含量升高可通过诱导基底前脑腺苷升高或亚硝基化蛋白质二硫异构酶导致orexin肽错误折叠,抑制orexin能神经的活性,促进睡眠。这可能是YZG-331镇静催眠作用另一机制。