小花碱茅是一种特殊的具有抗盐性,耐旱耐低温的野生植物,由于其生理特性不易进行遗传转化,而悬浮培养细胞可以解决这一难题并可以提供大量的转化子。同时稳定表达体系比瞬时表达体系的构建需要更多的时间,如何有效建立一个所需时间短效率高的稳定遗传转化体系是本研究中的重点。并且将这个体系应用于亚细胞定位的研究中,相较于瞬时表达体系稳定遗传体系也有着相应优势。是一种特殊的具有抗盐性的野生草本植物,也是一个潜在的抗性基因库。目前对于它的研究多采用异源系统,成熟的同源表达体系并未见报道。稳定表达体系的建立耗时长,且存在一些不确定因素影响目的基因的解析。 我们在这里介绍一种小花碱茅悬浮培养细胞建立的方式,并通过培养条件的优化,我们获得分散良好增长迅速的悬浮培养细胞体系,以此为材料建立一个高效迅速的稳定转基因的方式。同时将这个体系应用于亚细胞定位的研究,并获得很好的结果。这个转化体系不仅可以用同源体系来表达分析小花碱茅的基因,也可以用于其余物种功能基因的解析。由于转化周期短,除了用于亚细胞定位的研究外还有多种用途,同时也可以作为一些野生植物或再生困难的植物研究的参照。 我们建立了一种以小花碱茅悬浮培养细胞为材料通过农杆菌介导的方式快速高效的稳定遗传转化的方式。