人甲状旁腺素（human parathyroid hormone）是由人甲状旁腺主细胞分泌出来的活性多肽,通过调节肾脏、骨骼等细胞来维持磷酸盐和血钙的自身的稳定。人甲状旁腺素1-84（PTH 1-84）含有84个氨基酸的多肽链分子,分子量是9.5 kDa。在人体内是由甲状旁腺主细胞产生的。调节人体的骨转换及磷、钙的代谢。近几年来的医学研究证明,PTH在用于治疗骨质疏松上有很好的临床应用价值,疗效也很好且没有其他副作用,而且还可以作为甲状腺功能亢进的取代药物。本文研究的PTH 1-84是通过基因工程重组技术开发的一种蛋白药物,生理作用为调节钙磷代谢,肾、骨和小肠是靶器官,维持人体血钙的稳定,作用靶点明确、机理清楚,主治绝经后妇女骨质疏松症。本文主要的研究内容包括以下几个方面:利用基因工程方法以E.coli BL-21为宿主菌,将人甲状旁腺素基因连接到pGEX-4T-1载体,形成重组质粒pGEX-4T-1-hPTH,导入宿主菌中,表达融合蛋白,通过对诱导条件和IPTG的浓度的优化,确定了最终的培养条件为:OD₆₀₀值为20开始诱导,IPTG的浓度为0.6 mM,诱导时间4 h,最后离心收集菌体冻存。菌体经过破碎离心收集上清、DEAE层析、GST亲和层析、肠激酶酶切、Capto Q层析、SP层析、CM层析,最终得到纯度合格的目的蛋白PTH 1-84,经过经SDS-PAGE电泳及RP-HPLC的分析纯度大于98%,活性和内毒素均达到质量标准。本文使用先进的基因工程技术及纯化技术,成功地将PTH1-84基因链接pGEX-4T-1载体,并成功的转化到大肠杆菌中进行融合蛋白的表达,经过实验优化后,发酵液菌体的湿重60 g/L,目标蛋白占总蛋白的20%以上。