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目的本实验采用慢性不可预知性温和应激(CUMS)模型大鼠模拟人类抑郁症状,观察特异性阻断剂SP600125阻断JNK通路条件下,电针对模型大鼠行为学的影响和对HPA轴相关指标的调节作用。探讨电针临床抗抑郁作用机制。方法1分组将72只SD雄性大鼠,随机分为8组,每组9只:空白组、模型组、模型+氟西汀组、模型+电针组、模型+溶剂组、模型+阻断剂组、模型+氟西汀+阻断剂组、模型+电针+阻断剂组。2造模方法采用孤养结合慢性不可预知性温和应激方法制备抑郁大鼠模型,应激方法包括:断食24h;断水24h;束缚2h;震荡30min;夹尾3 min;潮湿垫料24h;夜间光照12h。实验过程中每种应激刺激平均3次,不连续使用同一种应激方式,共造模21天。在造模前一周,模型+溶剂组、模型+阻断剂组、模型+氟西汀+阻断剂组、模型+电针+阻断剂组进行侧脑室套管埋置手术。3干预方法电针干预选取“内关”和“三阴交”穴,针刺深度为0.3~0.5cm,双侧“三阴交”穴针柄连接HANS LH-202型电针仪,电针频率为2Hz,电流强度为0.6mA,以局部微颤为宜,每次20min,每天1次。氟西汀用蒸馏水配成0.2mg/ml的混悬液,以1.8mg/kg灌胃给药,每天1次。4处理方法空白组不给予任何刺激,正常群居饲养。其余各组均单笼饲养并接受21天慢性应激刺激。同时,模型+电针组在每天造模前30min进行电针干预;模型+氟西汀组在每天应激前30min进行氟西汀灌胃给药;模型+溶剂组在应激前1h给予10ul/d DMSO侧脑室注射;模型+阻断剂组在应激前1h给予10ul/d用DMSO配制的SP600125稀释液侧脑室注射;模型+电针+阻断剂组、模型+氟西汀+阻断剂组在应激前1h给予10ul/d阻断剂SP600125稀释液侧脑室注射,然后应激前30min分别给予电针干预和氟西汀灌胃给药。5检测方法采用糖水消耗实验(Sucrose Intake Test)评价抑郁模型大鼠行为学改变情况。采用Elisa法检测大鼠血清ACTH、垂体ACTH、血清CORT、下丘脑CRH表达情况。采用免疫组化法检测海马CA3区大鼠海马GR表达。结果1行为学变化通过不同时间点各组大鼠糖水偏好实验发现,与模型+溶剂组相比,模型+电针组大鼠糖水偏好显著升高(P<0.01);与模型+氟西汀组相比,模型+电针组大鼠糖水偏好显著升高(P<0.05)。实验0-7天时,模型组糖水偏好指数的下降趋势比空白组更明显。模型+溶剂组糖水偏好指数的下降更为明显。而模型+电针组糖水偏好指数一直持续增加。2血清ACTH含量的变化与空白组相比,模型组血清ACTH表达显著增加(P<0.05),说明应激导致大鼠HPA轴亢进。与模型组相比,模型+氟西汀组血清ACTH显著降低(P<0.01),说明氟西汀对亢进的HPA轴有调节作用;模型+电针组血清ACTH显著降低(P<0.05),同样说明电针对亢进的HPA轴有调节作用。与模型+溶剂组相比,模型+电针+阻断剂组血清ACTH显著降低(P<0.05),模型+氟西汀+阻断剂组没有显著差异,但有降低趋势,而模型+阻断剂组与模型+溶剂组数值差异不明显。与模型+阻断剂组相比,模型+电针+阻断剂组血清ACTH显著降低(P<0.05),模型+氟西汀+阻断剂组没有显著差异,但有降低趋势,推测在阻断剂条件下,两种干预方法对亢进的HPA轴均有调节作用,而电针干预效果比氟西汀更明显。3垂体ACTH含量的变化与空白组相比,模型组垂体ACTH表达显著增加(P<0.01),说明应激导致大鼠HPA轴亢进。与模型组相比,模型+氟西汀组和模型+电针组垂体ACTH均显著降低(均为P<0.01),说明药物和电针干预对亢进的HPA轴均有调节作用。与模型十溶剂组相比,模型十阻断剂组和模型+氟西汀+阻断剂组垂体ACTH均显著降低(均为P<0.05),模型十电针+阻断剂组垂体ACTH显著降低(P<0.01),说明在有侧脑室注射影响的情况下,电针以及药物干预和阻断剂对亢进的HPA轴均有调节作用;未进行侧脑室注射的情况下,电针以及药物干预有明显效果。与模型+阻断剂组相比,模型+电针+阻断剂组垂体ACTH显著降低(尸<0.05),而模型+氟西汀+阻断剂组未出现明显差异,并且,与模型+氟西汀+阻断剂组相比,模型+电针+阻断剂组垂体ACTH显著降低(P<0.05),与说明在阻断剂阻断条件下,电针干预效果更明显。4血清CORT含量的变化与空白组相比,模型组血清CORT表达显著增加(尸<0.01),说明应激导致大鼠HPA轴亢进。与模型组相比,模型+氟西汀组和模型+电针组血清CORT均显著降低(均为P<0.01),说明药物和电针干预对亢进的HPA轴均有调节作用。与模型+阻断剂组相比,模型+氟西汀+阻断剂组和模型+电针+阻断剂组的血清CORT在数值上降低,但没有统计学差异。5下丘脑CRH含量的变化各组大鼠下丘脑CRH表达无显著差异(P>0.05)。6海马GR含量的变化在海马CA3区,与空白组相比,模型组GR含量虽没有统计学差异,但在数值上出现了降低趋势,推测应激导致大鼠海马CA3脑区GR含量降低。与模型组相比,模型+氟西汀组和模型+电针组GR含量虽没有统计学差异,但都有上升趋势,推测两种干预对应激大鼠海马CA3脑区GR有上调作用。与模型+溶剂组相比,模型+阻断剂组GR显著升高(P<0.05),说明阻断剂对应激大鼠海马CA3脑区GR有上调作用。模型+氟西汀+阻断剂组和模型+电针+阻断剂组GR也有升高趋势,推测在有侧脑室注射影响的情况下,两种干预方法对应激大鼠海马CA3脑区GR也有上调作用。结论1糖水偏好指数结果提示:孤养结合慢性应激刺激导致大鼠快感缺失,电针干预可逆转大鼠这一行为;2电针干预改善了模型大鼠的抑郁样行为,可能是通过下调大鼠血清ACTH、垂体ACTH与血清CORT实现的;3干预后,大鼠血清ACTH和垂体ACTH的变化相似,提示中枢和外周的变化趋同性;4电针干预对模型大鼠JNK通路的影响可以通过调节GR(海马CA3区)实现;5与氟西汀+阻断剂干预方法相比,电针+阻断剂干预对模型大鼠血清ACTH和垂体ACTH的作用更强。