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目的观察针灸对睾酮低下老年大鼠血清总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)含量与睾丸间质细胞(Leydig细胞)核因子-κB(NF-κB)慢性炎症通路及NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响,探讨针灸延缓老年大鼠Leydig细胞衰老的作用机制。方法将8只SD青年雄性大鼠血清TT、FT进行检测,并计算其95%置信区间,并检测50只SD老年雄性大鼠FT、TT,低于该数字即纳入治疗。将纳入的40只老年大鼠按体质量随机分为5组:温针灸组(AM)、温和灸组(MM)、电针组(EA)、药物组(MC)及老年对照组(OC),8只SD青年雄性大鼠作为青年对照组(YC)。EA组、AM组及MM组均取“肾俞”“关元”穴,分别给予电针、温针灸、温和灸干预,每日1次,每次治疗15 min,每周治疗5天,持续干预8周。MC组给予腹部皮下左右交替注射丙酸睾酮注射液,7mg/kg/3 d,共治疗8周。OC组和YC组给予腹部皮下左右交替注射0.9%氯化钠溶液,注射剂量及疗程同MC组。观察各组大鼠治疗前后力竭游泳时间变化,采用酶1联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠治疗前后血清TT和FT水平,免疫组化法(Immunohistochemical,IHC)检测Leydig细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)蛋白表达,免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system,RT-q PCR)检测大鼠睾丸NF-κB p 65、NLRP3、Caspase-1、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及环氧化酶-2(COX-2)蛋白及m RNA表达。结果1.治疗前,OC组力竭游泳时间低于YC组(P<0.01);治疗后,AM组、MM组、EA组与MC组力竭游泳时间高于OC组且低于YC组(P<0.01)。治疗前,OC组血清TT、FT水平低于YC组(P<0.01);治疗后,AM组、MM组、EA组与MC组血清TT、FT水平高于OC组且低于YC组(P<0.01)。2.与YC组比较,OC组睾丸NF-κB p 65、NLRP3、Caspase-1、COX-2、IL-1β及TNF-α蛋白及m RNA表达明显上调(P<0.01),与OC组比较,AM组、MM组及EA组可显著下调NF-κB p 65、NLRP3、Caspase-1、COX-2、IL-1β及TNF-α蛋白及m RNA的表达(P<0.01)。结论温针灸、温和灸及电针组均能提高睾酮低下老年大鼠血清TT、FT水平及力竭游泳时间,并能通过NF-κB慢性炎症通路及NLRP3炎性小体降低老年大鼠睾丸组织的慢性炎性反应,这可能是针灸延缓雄性生殖衰老的作用机制之一。