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目的：本实验在应用导师经验方治疗前列腺癌取得较好临床效果基础上，通过体内、体外实验，探讨方中有效抗癌成分雷公藤内酯醇对小鼠前列腺癌细胞株RM-1和小鼠前列腺癌模型的增殖抑制作用及其可能机制，以期为临床提供安全有效的抗前列腺癌药物。方法：体外实验采用小鼠前列腺癌RM-1传代细胞，用MTT实验检测TL对RM-1细胞的增殖抑制作用；用吖啶橙荧光染色检测TL对RM-1凋亡细胞形态学影响；用流式细胞术分析TL对RM-1细胞周期及凋亡峰的作用；用梯状电泳方法检测TL对RM-1细胞DNA的凋亡作用；用RT-PCR法检测TL对RM-1细胞caspase-3、bcl-2 mRNA表达水平的影响。体内实验采用C57BL／6小鼠皮下注射RM-1细胞，建立前列腺癌动物模型，检测肿瘤体积和重量计算肿瘤生长抑制率；TUNEL技术检测前列腺癌组织中凋亡细胞；免疫组化检测方法观察药物对实验动物肿瘤组织caspase-3基因及其蛋白bcl-2表达水平的影响。结果：1．TL（5、10、20、40、80 ng／ml）处理后RM-1细胞生长抑制率分别为9.8％、25.1％、39.2％、48.8％、53.2％，以TL（10、20 ng／ml）处理RM-1细胞12、24、36、48h后，细胞生长抑制率分别为8.4％、25.1％、36.1％、42.4％和10.2％、39.2％、50.2％、58.5％，MTT检测显示雷公藤内酯醇呈剂量和时间依赖性抑制RM-1细胞的生长。2．前列腺癌小鼠模型建立14d后，TL（0.2mg／kg）、TL（0.4mg／kg）、TL（0.8／g／kg）组小鼠肿瘤生长较慢，瘤重与模型对照组比较差异显著（P＜0.01）。体内实验结果显示一定浓度TL能抑制小鼠体内前列腺癌细胞生长。3．吖啶橙荧光染色观察显示，经TL处理RM-1细胞核浓缩，细胞膜内陷、胞内有不规则橘黄色颗粒，呈凋亡样形态学改变。4．流式细胞术分析细胞周期及凋亡峰，结果显示TL（10、20ng／ml）作用RM-1细胞48h后，在G1期前出现明显的凋亡峰，凋亡率分别为41.1％和57.8％。5．DNA电泳分析表明，TL处理24h、36h、48h各组均可见DNA“梯形”图谱，48h作用细胞DNA“梯形”条带尤为明显。6．TUNEL染色结果显示，前列腺癌动物模型经TL给药后，TUNEL染色阳性细胞增多，其核内有棕黄颗粒-凋亡小体，呈小圆形，核浓缩、大量微核体的形成。实验表明TL具有诱导前列腺癌细胞凋亡的作用。7．RT-PCR检测显示，TL处理RM-1细胞caspase-3 mRNA表达高于未处理对照细胞，提示药物能通过提高caspase-3表达诱导细胞凋亡。而bcl-2 mRNA表达低于未处理对照细胞，提示药物能通过降低bcl-2表达诱导细胞凋亡。8．免疫组化结果显示，给予TL处理小鼠前列腺癌组织中caspase-3蛋白表达阳性细胞明显高于模型对照组，提示药物能通过提高caspase-3表达诱导细胞凋亡。而bcl-2蛋白阳性细胞表达明显低于模型对照组，进一步提示药物能降低bcl-2蛋白表达，而且bcl-2蛋白也与前列腺癌细胞分化程度有关。结论：1．TL抑制小鼠前列腺癌细胞株RM-1增殖，并呈一定的时间和剂量依赖性。2．TL抑制小鼠体内前列腺癌细胞生长。3．TL诱导RM-1细胞凋亡。4．TL诱导小鼠体内前列腺癌细胞凋亡。5．TL抑制肿瘤增长作用是通过诱导细胞凋亡实现的。6．TL提高RM-1细胞caspase-3并降低bcl-2mRNA表达。7．TL提高小鼠体内前列腺癌细胞caspase-3并降低bcl-2蛋白表达。8．TL通过增加caspase-3表达并降低bcl-2表达诱导前列腺癌细胞凋亡。