【摘 要】
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第一部分Abp1在调节性T细胞的发育及功能中的影响目的:探讨肌动蛋白连接蛋白1(Actin-binding protein 1,Abp1)对调节性T细胞(Treg)发育及功能的影响。方法:通过流式细胞术检测野生型小鼠(WT组)和Abp1基因敲除小鼠(KO组)的胸腺、脾脏、浅表淋巴结及肠系膜淋巴结中T淋巴细胞及Treg细胞的比例、数量以及相关功能性分子的表达,并利用体外抑制试验检测Abp1缺失对Tr
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第一部分Abp1在调节性T细胞的发育及功能中的影响目的:探讨肌动蛋白连接蛋白1(Actin-binding protein 1,Abp1)对调节性T细胞(Treg)发育及功能的影响。方法:通过流式细胞术检测野生型小鼠(WT组)和Abp1基因敲除小鼠(KO组)的胸腺、脾脏、浅表淋巴结及肠系膜淋巴结中T淋巴细胞及Treg细胞的比例、数量以及相关功能性分子的表达,并利用体外抑制试验检测Abp1缺失对Treg抑制功能的影响。结果:Abp1 KO小鼠的胸腺、脾脏、浅表淋巴结及肠系膜淋巴结中的Treg的比例和细胞数目与WT小鼠相比没有明显的变化,同时缺失Abp1的Treg细胞的主要功能性分子ICOS、CTLA4、PD-1和NRP-1的表达亦没有显著的差异,进一步实验发现缺失Abp1的Treg细胞对初始T细胞向活化T细胞分化的抑制作用较WT相比无明显变化。结论:Abp1对Treg细胞的发育和功能没有显著影响。第二部分PGRN对B细胞发育及BCR信号的影响目的:探索PGRN如何调节BCR信号和外周B细胞分化的潜在分子机制。方法:通过流式细胞术检测野生型小鼠(WT组)和PGRN基因敲除小鼠(KO组)的骨髓B细胞和外周B细胞各亚群比例。使用激光共聚焦显微镜分别检测p Y、p CD19、p BTK和p SHIP与BCR之间的共定位。采用免疫印迹技术检测BCR近端、远端及负信号分子变化。结果:PGRN KO小鼠的骨髓B细胞与WT小鼠相比没有明显变化。而KO小鼠的外周B细胞亚群MZ B细胞比例升高,GC B细胞的比例则有所下降。KO小鼠的脾脏中的p Y、p CD19、p BTK和p SHIP与BCR之间的共定位均高于WT小鼠。同时KO小鼠的BCR上游信号分子CD19,CD19的下游信号分子BTK、PI3K、中间和远端的信号分子FOXO-1、Akt、S6以及负BCR信号分子SHIP的磷酸化水平较WT均有所升高。结论:PGRN对B细胞早期发育影响不明显,但对外周B细胞的分化起重要作用。PGRN的缺乏可能增强记忆性免疫应答,同时增强了B细胞的活化及BCR的激活。
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