目的： 1.双胸蚓组织核酸酶粗提液制备及工艺优化； 2.建立双胸蚓核酸酶分离纯化的技术体系； 3.对双胸蚓组织核酸酶的理化性质及其酶学性质进行初步研究。 方法： 1. 双胸蚓组织核酸酶粗提液的制备及工艺优化观察不同pH条件下热变性对核酸酶提取的影响； 观察丙酮粉制备及碳酸铵处理对核酸酶提取的影响； 以PAGE-DNA功能胶和琼脂糖凝胶电泳测活相结合作为双胸蚓组织核酸酶制备过程中核酸酶活性的监测体系，针对实验中发现的两组性质不同的核酸酶类，分别采取不同的制备工艺。 2. 双胸蚓组织核酸酶的层析纯化将制备的丙酮粉复溶液依次进行常压CM阳离子交换层析，高压CM阳离子交换层析，高压HP2疏水层析和RP-HPLC层析，对双胸蚓组织中的一组核酸酶进行分离纯化。 3. 双胸蚓组织核酸酶的电泳纯化和酶学性质研究采用PAGE， 2D-PAGE，PAGE-DNA功能胶，结合考马斯亮蓝染色比对切胶法，对浓缩的柱层析活性组分进行电泳分离；利用SDS-PAGE和Sephacryl S-200凝胶过滤两种方法测定酶分子量；将该酶分别与环状质粒DNA和线状DNA反应，测定该核酸酶的底物特异性；不同温度、pH条件对该核酸酶活力影响；相同温度和pH条件下金属离子和电泳中的部分理化因素对该酶活性的影响。 结论： 1.进一步优化了双胸蚓组织核酸酶粗提液的制备工艺，通过改变粗提物制备方法和层析策略，最后得到一种高等电点、高活性的核酸酶。 2.活性研究实验证明：该核酸酶(EWD)可降解多种DNA，分子量为32KD，等电点约为7，最适反应pH为5.2，最适反应温度为41.5℃，Mg<2+>，Ca<2+>，Mn<2+>对其有激活作用，而Zn<2+>，咪唑，EDTA，K<+>和Cu<2+>可以抑制其活性。