【摘 要】
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血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)反义多肽的基因克隆、原核表达和生物活性鉴定硕士研究生:李书华硕士生导师:张雅洁 教授中文摘要血管内皮生长因子受体3(vascular endothelia
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血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)反义多肽的基因克隆、原核表达和生物活性鉴定硕士研究生:李书华硕士生导师:张雅洁 教授中文摘要血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor 3,VEGFR-3)属酪氨酸激酶受体家族成员,在肿瘤间质血管和淋巴管内皮细胞及乳腺癌、甲状腺癌、卡波氏肉瘤等肿瘤细胞均有表达,与肿瘤血管及淋巴管新生、肿瘤细胞增殖密切相关.研究表明,阻断VEGFR-3的表达,可抑制肿瘤的生长和转移.本研究的目的是拟用VEGFR-3反义多肽阻断VEGF-C/VEGFR-3信号传导通路,观察对视网膜母细胞瘤(Rb50)生长的抑制作用,为临床应用VEGFR-3反义多肽治疗肿瘤提供实验理论依据.结论1.从胚胎肺组织中提取总RNA,RT-PCR扩增出VEGFR-3胞外第二免疫球蛋白样区(2-Ig)的基因,并将其反向克隆入原核表达质粒pGEX-6p-3,构建了pGEX-6p-3-VEGFR-3重组质粒.2.通过体外诱导重组质粒表达制备融合蛋白,经亲和层析纯化、蛋白剪切,获得了VEGFR-3反义多肽.3.VEGFR-3反义多肽对Rb50细胞生长有显著的抑制作用,该抑制作用呈明显的剂量依赖性.证明VEGFR-3反义多肽具有较强的生物活性.
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