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手性是宇宙普遍特征之一。各对映体药物具有不同生理活性,并且在大多数情况下,只有一种药物对映体具有显著的药理生物活性,另一种对映体不具有药理生物活性或具有毒性。胺类化合物是一种重要的生理活性物质。存在于人体内的手性胺类化合物发挥着重要的生理作用。因此,建立一种手性胺类化合物的分析方法对手性药物和手性代谢组学研究有着重要意义。目前,稳定同位素标记衍生化(ICD)结合液相色谱-质谱(LC-MS)技术应用于手性胺类化合物分析。然而很少有稳定同位素标记手性衍生化试剂。因此,本文开发新型稳定同位素标记手性衍生化试剂,利用LC-MS,建立手性胺的分离分析方法,并此法应用于实际样品分析。本文所建立的分析方法将为新药开发及代谢组学的研究和疾病生物标志物发现提供有效、可靠的分析测试手段。主要研究内容如下:1.1,5-二氟-2,4-二硝基苯分别与甲基哌嗪和甲基哌嗪-d8反应合成1-(5-氟-2,4-二硝基苯基)-4-甲基哌嗪)(d0-PPZ)和d8-PPZ。L-脯氨酸分别与d0-PPZ和d8-PPZ反应合成(5)-1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,4-二硝基苯基)吡咯烷-2-羧酸(d0-PPZ-Pro)d8-PPZ-Pro。通过核磁共振、质谱等仪器对其结构进行表征。2.研究衍生化反应温度和时间等因素对衍生化反应产率的影响,确立d0-Pro-PPZ与胺的最佳衍生化反应条件。通过优化流动相组成和比例等,确立最佳色谱分离条件。本实验采用的六种手性胺类化合物(苯乙胺、萘乙胺、1-氨基茚满、苯丙氨酸甲酯盐酸盐、缬氨酸甲酯盐酸盐、苯甘氨酸甲酯盐酸盐),在此色谱条件下得到完全分离(分离度:2.1-3.8)。3.1-氨基茚满是帕金森治疗药的一种代谢物,为了检测体液中的1-氨基茚满,本文采用液相色谱-串联质谱技术(LC-MS/MS),建立了 1-氨基茚满的分析方法。考察了不同能量诱导碰撞解离(CID)对特定m/z离子强度的影响。当结果CID为17 eV时,有特征碎片峰m/z=289.2(或297.2)。1-氨基茚满在10 nmol/L-100 nmol/L内,浓度与峰面积成良好的线性关系,其最低检测线为50fmol。所建立的分析方法应用于实际样品(唾液)中1-氨基茚满分析。